石墨管细胞毒性测试

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

细胞活性评估：

• MTT法检测：细胞活力抑制率（IC50值，参照ISO10993-5）、LD漏出率（LDH释放量百分比≥15%）
• 中性红摄取试验：活细胞染色指数（吸光度OD值）

• AnnexinV/PI双染：早期凋亡率（%）、晚期凋亡/坏死率（%）
• Caspase活性检测：Caspase-3相对活性（荧光强度单位）

• 炎症因子释放：IL-6浓度（pg/mL）、TNF-α浓度（pg/mL）
• NF-κB通路激活：p65磷酸化水平（Westernblot灰度值）

• 活性氧检测：ROS生成量（DCF荧光强度）、SOD酶活性（U/mg蛋白）
• 谷胱甘肽水平：GSH/GSSG比值（比色法测定）

• 彗星试验：DNA尾矩（相对迁移距离）、双链断裂指数（γ-H2AX焦点数）
• 微核形成率：微核细胞比例（‰，参照OECDTG487）

• 流式细胞术：G0/G1期阻滞比例（%）、S期减少率（%）
• 分裂指数测定：有丝分裂细胞计数（每1000细胞）

• 膜流动性检测：荧光偏振度（P值）
• 膜电位变化：DiBAC4(3)荧光强度（相对单位）

• 细胞粘附率：贴壁细胞计数（个/视野）
• 划痕愈合试验：迁移抑制率（%，参照ISO10993-22）

• qPCR分析：促凋亡基因Bax表达倍数、抗凋亡基因Bcl-2表达倍数
• 炎症基因：IL-1βmRNA水平（相对表达量）

• SDS-PAGE定量：总蛋白合成降低率（%）
• Westernblot：热休克蛋白HSP70表达（灰度比值）

检测范围

1.单壁碳纳米管（SWCNTs）：评估直径1-2nm管材对肺上皮细胞的直接穿透毒性，重点检测氧化应激和DNA损伤

2.多壁碳纳米管（MWCNTs）：考察长度50-200μm管材在巨噬细胞中的累积效应，侧重炎症因子释放和细胞吞噬率

3.石墨烯纳米管：分析片层结构诱导的肝细胞膜损伤，核心检测LD漏出率和膜流动性变化

4.羧基功能化石墨管：测试表面官能团对成纤维细胞相容性的影响，聚焦细胞粘附和增殖抑制

5.聚乙二醇修饰石墨管：评估聚合物涂层在血细胞中的生物降解毒性，重点测定溶血率和补体激活

6.医用植入石墨管复合材料：检测骨细胞长期暴露下的慢性毒性，包括凋亡率累积和基因突变

7.电子器件封装石墨管：评价电磁辐射协同作用下神经细胞的氧化损伤，侧重ROS生成和SOD活性

8.环境水体释放石墨管：分析水生藻类细胞暴露风险，核心检测叶绿素合成抑制和微核形成

9.药物载体石墨管系统：考察抗癌药物缓释过程中对癌细胞的协同毒性，重点监测Caspase活性和周期阻滞

10.增强材料石墨管纤维：评估物理刺激对皮肤细胞的机械损伤，包括膜完整性测试和炎症响应

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5：体外细胞毒性试验（使用MTT/中性红法，暴露时间24-72小时）
• ASTMF813-20：医疗器械直接接触细胞毒性评估（指定L929细胞系培养）
• OECDTG487：体外哺乳动物细胞微核试验（需S9代谢活化系统）
• ISO10993-22：纳米材料诱导细胞迁移抑制测试（划痕法愈合率计算）

• GB/T16886.5-2017：医疗器械生物学评价第5部分体外细胞毒性（与ISO类似但稀释梯度不同）
• GB/T21866-2008：化学品基因突变试验方法（使用CHL细胞株，暴露浓度梯度差异）
• GB/T27818-2011：纳米材料溶血性试验（检测方法类似ASTM但温育时间延长）
• GB/T16175-2008：医用有机材料细胞毒性评价（采用琼脂扩散法，参数设置差异）

检测设备

1.多功能酶标仪：BioTekSynergyH1（检测波长450-750nm，精度±0.003Abs）

2.倒置显微镜：OlympusIX73（放大倍数40-400x，LED透射光源）

3.流式细胞仪：BDAccuriC6（激光波长488nm，检测限10^3颗粒/mL）

4.CO2培养箱：ThermoScientificHeracell160i（温度控制±0.1°C，CO2范围0-20%）

5.超净工作台：EscoAirstreamClassII（洁净度ISO5级，风速0.36m/s）

6.高速离心机：Eppendorf5804R（转速100-15000rpm，温度范围-10°C至40°C）

7.实时PCR仪：AppliedBiosystemsQuantStudio5（温度梯度精度±0.1°C，通道数4）

8.紫外分光光度计：ShimadzuUV-2600i（波长范围190-1100nm，带宽1nm）

9.恒温振荡器：InforsHTMultitron（振幅3-50mm，恒温范围4-60°C）

10.荧光显微镜：NikonEclipseTi2（激发波长365-647nm，EMCCD分辨率）

11.细胞计数仪：InvitrogenCountessII（检测范围5x10^4-10^7cells/mL）

12.凝胶成像系统：Bio-RadChemiDocMP（灵敏度0.1pg蛋白，CCD分辨率）

13.超低温冰箱：HaierDW-86L338（存储温度-86°C，容积338L）

14.电化学工作站：CHI660E（电位范围±10V，电流精度0.1pA）

15.纳米粒径分析仪：MalvernNanoSightNS300（粒径检测10-2000nm，浓度范围10^6-10^9/mL）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质