重组蛋白药物致敏风险检测

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

免疫原性评估：

• 抗药物抗体检测：ADA滴度（参照ICHS6）、中和抗体阳性率（%）
• T细胞活化分析：IFN-γ浓度（pg/mL）、IL-4水平（pg/mL）
• 细胞因子释放综合征评估：IL-6峰值（ng/mL）、TNF-α阈值（≤50pg/mL）

• 组胺释放试验：组胺浓度（ng/mL，参照ISO10993-10）、嗜碱性粒细胞脱颗粒率（%）
• IgE结合能力：特异性IgE滴度（kU/L）、FcεRI受体结合指数
• 补体激活检测：C3a浓度（μg/mL）、C5a水平（μg/mL）

• 宿主细胞蛋白残留：HCP含量（≤100ng/mg，参照ICHQ6B）、DNA残留量（≤10ng/dose）
• 聚集体形成：SEC-HPLC检测（单体比例≥95%）、聚集体大小（nm）
• 内毒素检测：LAL法内毒素（≤0.05EU/mL）、鲎试剂灵敏度（0.01EU/mL）

• 糖基化修饰：N-糖谱分析（高甘露糖比例≤5%）、唾液酸含量（mg/g）
• 氧化降解：甲硫氨酸氧化率（%）、二硫键错配指数
• 折叠稳定性：圆二色谱Tm值（℃）、动态光散射多分散性（PDI≤0.2）

• 细胞活力检测：MTT法IC50（μg/mL）、LDH释放率（%）
• 凋亡诱导：AnnexinV阳性细胞（%）、caspase-3活性（RFU）
• 炎症反应：NF-κB活化水平（倍数变化）、COX-2表达量

• Fc受体亲和力：KD值（nM，SPR法）、FcγRIIa结合常数
• 靶点特异性：EC50值（nM）、受体占有率（%）
• 交叉反应性：异源抗体结合指数（参照FDA指南）

• 热稳定性：DSC熔解温度（Tm，℃）、加速稳定性降解产物（%）
• pH依赖性：等电点（pI）、电荷变异体比例
• 冻融循环：活性回收率（≥90%）、颗粒数（个/mL）

• 无菌测试：膜过滤法（参照ISO11737）、生长促进试验
• 生物负荷：总需氧菌计数（CFU/mL）、真菌检测
• 病毒安全性：逆转录酶活性（cpm）、内源病毒筛查

• Ames试验：回复突变菌落数（参照OECD471）、代谢活化率
• 染色体畸变：微核频率（‰）、彗星试验DNA损伤
• 突变检测：HPRT基因突变率、转基因模型分析

• 体外效力：EC90值（μg/mL）、中和抗体效价
• 动物模型致敏性：豚鼠过敏反应评分（0-4级）、被动皮肤过敏试验
• 临床相关性：预测性生物标志物水平（如Tryptase浓度）

检测范围

1.单克隆抗体药物：涵盖IgG1、IgG4亚型，重点检测Fc片段介导的补体激活和ADA形成风险

2.重组细胞因子：包括IL-2、IFN-α等，侧重细胞因子风暴和T细胞过度活化评估

3.融合蛋白药物：如TNF受体-Fc融合体，聚焦结构不稳定引起的聚集体致敏

4.治疗性酶制剂：例如溶酶体酶，重点检测糖基化异常和内毒素残留

5.疫苗佐剂蛋白：含重组抗原的疫苗，强调IgE介导的速发型过敏反应

6.血液因子产品：如重组凝血因子，侧重宿主蛋白残留和免疫复合物形成

7.生长因子类药物：包括EGF、VEGF，重点分析受体过度刺激导致的炎症

8.免疫检查点抑制剂：如PD-1抗体，聚焦T细胞活化失衡和自身免疫风险

9.酶替代疗法产品：例如重组葡糖脑苷脂酶，强调氧化降解产物的致敏性

10.双特异性抗体：含多靶点结构，重点评估结构异质性和交叉反应性

检测方法

国际标准：

• ICHS6(R1)生物技术产品临床前安全性评价（涵盖免疫原性测试）
• ISO10993-10医疗器械致敏性评价（用于组胺释放试验）
• USP<85>内毒素测试（LAL法规范）
• EMACHMP生物类似药指南（免疫原性可比性要求）
• FDAGuidanceforIndustryImmunogenicityAssessment（ADA检测方法）

• 中国药典2020版三部生物制品（内毒素和HCP检测规范）
• GB/T14233.1-2022医疗器械生物学评价（致敏性试验方法）
• YY/T0127-2018生物制品稳定性试验（加速降解标准）
• GB/T16886.10-2017医疗器械致敏性试验（细胞毒性方法）
• 中国药典2020版四部微生物限度检查（无菌测试要求）

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSCantoII（检测通道8个，流速60μL/min，灵敏度<100MESF）

2.ELISA阅读器：BioTekSynergyH1（波长范围220-1000nm，精度±1nm，孔板容量384孔）

3.高效液相色谱仪：Agilent1260InfinityII（SEC柱，粒径5μm，流速1mL/min，检测限0.1ng）

4.质谱仪：ThermoScientificQExactiveHF（分辨率140,000，质量精度<2ppm，扫描速率18Hz）

5.圆二色谱仪：JascoJ-1500（波长范围185-900nm，温度控制±0.1°C，Tm测量精度±0.5°C）

6.动态光散射仪：MalvernZetasizerNanoZS（粒径范围0.3nm-10μm，多分散指数精度±0.01）

7.表面等离子共振仪：BiacoreT200（KD检测范围1pM-100μM，流速范围1-100μL/min）

8.细胞培养系统：EppendorfCellCultureIncubator（CO2控制5%，温度37°C±0.2°C，湿度95%）

9.酶标仪：PerkinElmerEnVision（荧光检测灵敏度1pM，光密度范围0-4OD）

10.PCR仪：Bio-RadCFX96Touch（温度梯度0.1°C，循环数40，检测限10拷贝）

11.离心机：EppendorfCentrifuge5425R（最大转速15,000rpm，容量24x1.5mL，温度控制-10°C至40°C）

12.显微镜：OlympusIX83（物镜100x，分辨率0.2μm，荧光通道5个）

13.冻干机：LabconcoFreeZone（真空度<100mTorr，温度-50°C，容量6L）

14.电泳系统：Bio-RadMini-PROTEAN（电压范围10-500V，凝胶尺寸8x10cm，检测限1ng）

15.生物反应器：SartoriusBIOSTAT（容量5L，pH控制±0.1，DO控制20-100%）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质