微阵列杂交一致性测试

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

杂交性能检测：

• 杂交效率：杂交率（≥95%）、未杂交率（≤5%，参照ISO20395:2018）
• 杂交均匀性：空间变异系数（CV≤8%）、点样一致性（直径偏差±5μm）

信号检测评估：

• 信号强度：平均荧光强度（≥5000RFU）、最大信号值（动态范围≥10⁴）
• 信噪比：背景校JianCe噪比（≥10:1）、局部信噪比（≥8:1）

背景噪声控制：

• 背景荧光：全局背景值（≤200RFU）、局部背景值（≤150RFU）
• 非特异性结合：交叉反应率（≤3%）、非靶标信号强度（≤100RFU）

重复性验证：

• 批内重复性：变异系数（CV≤5%）、标准差（SD≤50RFU）
• 批间重复性：差异率（≤8%）、相关系数（R≥0.95）

特异性检测：

• 靶标特异性：错配耐受性（ΔTm≤5°C）、同源序列干扰（≤5%信号衰减）
• 交叉杂交评估：同源基因交叉率（≤2%）、非特异性信号比例（≤1%）

线性范围测试：

• 浓度线性：线性相关系数（R²≥0.98）、斜率偏差（±10%）
• 动态范围：检测上限（≥100nM）、检测下限（≤1pM）

灵敏度评估：

• 检测限：最低检测浓度（≤1pM）、信噪比阈值（≥3:1）
• 定量限：CV值≤15%的最低浓度（≤5pM）、准确度偏差（±20%）

稳定性测试：

• 杂交液稳定性：活性保持率（≥90%after24h）、降解率（≤5%/h）
• 芯片保存稳定性：信号衰减率（≤10%after1month）、背景增长率（≤5%）

数据分析一致性：

• 数据归一化：尺度因子差异（≤1.2倍）、中位数比值（0.8-1.2）
• 表达量计算：foldchange误差（≤0.1）、p值一致性（α=0.05）

质量控制指标：

• 阳性对照：信号强度（≥8000RFU）、CV值（≤6%）
• 阴性对照：信号强度（≤300RFU）、假阳性率（≤0.1%）

检测范围

1.DNA微阵列芯片：涵盖寡核苷酸探针芯片，检测重点为杂交特异性、SNP分型准确性和探针结合效率

2.RNA表达微阵列：包括基因表达谱芯片，侧重信号线性度、背景噪声控制和表达量重复性

3.蛋白微阵列芯片：针对抗体-抗原杂交芯片，重点检测结合亲和力、交叉反应率和信号饱和度

4.高密度SNP芯片：用于基因组分型，检测重点为多态性位点准确性、callrate≥99%和批次一致性

5.低密度定制芯片：研究用小型芯片，侧重探针设计验证、杂交优化和成本效益评估

6.甲基化检测微阵列：涉及DNA甲基化分析，重点为杂交效率、甲基化水平准确性和背景干扰控制

7.miRNA表达芯片：小RNA检测芯片，检测重点为灵敏度、特异性及短序列杂交稳定性

8.染色体芯片（CGH）：用于拷贝数变异分析，侧重分辨率、动态范围和噪声抑制

9.多重PCR微阵列：整合PCR产物的芯片，重点检测扩增效率、杂交均匀性和污染控制

10.细胞芯片：基于细胞样本的微阵列，检测重点为活细胞杂交一致性、信号衰减率和生物重复性

检测方法

国际标准：

• ISO20395:2018微阵列技术验证方法（要求杂交效率≥95%，信噪比≥10:1）
• MIAME2.0微阵列实验最小信息标准（规定数据归一化方法和重复性指标）
• ASTME2536-21微阵列表面化学测试指南（涵盖背景噪声和结合稳定性评估）

国家标准：

• GB/T30989-2014微阵列芯片通用技术要求（规定线性范围R²≥0.95，CV≤10%）
• GB/T37872-2019生物芯片检测方法（要求检测限≤5pM，灵敏度信噪比≥3:1）
• YY/T1533-2017医疗器械用微阵列芯片（侧重稳定性和安全性测试）

方法差异说明：ISO标准强调全局信噪比和杂交率，而GB标准更注重线性相关系数和检测限，ASTM指南包括表面处理参数，YY/T标准增加生物相容性要求。

检测设备

1.微阵列杂交仪：AgilentG2545A型（温度控制精度±0.1°C，杂交体积范围5-100μL）

2.激光共聚焦扫描仪：GenePix4300A（分辨率5μm，荧光通道数4，动态范围10⁵）

3.荧光显微镜系统：OlympusBX63（物镜放大倍数10-100x，CCD分辨率2048x2048）

4.点样机器人：ArrayJetSprint（点样精度±10μm，点样速度1000点/小时）

5.芯片清洗站：BioGenexWashStation（流速控制0.1-10mL/min，温度范围20-50°C）

6.恒温孵育箱：MemmertIN260（温度稳定性±0.5°C，容量100片芯片）

7.荧光定量分析仪：TecanInfiniteM200（检测灵敏度1pM，波长范围200-1000nm）

8.数据采集软件：GenePixPro7.0（图像分析精度±2%，自动网格对齐功能）

9.归一化处理系统：LimmaR包（支持Quantile和LOESS归一化，误差率≤1%）

10.质量控制扫描器：NanoStringnCounter（计数精度±5%，线性动态范围10³）

11.芯片存储冰箱：ThermoScientificJianCeT-1386（温度-80°C±1°C，湿度控制10-30%）

12.离心干燥机：EppendorfConcentrator5301（转速100-1500rpm，干燥时间≤30min）

13.pH计与缓冲系统：MettlerToledoSevenExcellence（pH精度±0.01，离子强度监测0.1-1.0M）

14.自动化液体处理站：BeckmanCoulterBiomeki7（移液精度±0.5%，通量96孔板/5min）

15.实时温度监测器：VaisalaVeriteqEM100（记录间隔1s，温度范围-40°Cto85°C）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器资质