NBT法超氧阴离子染色试验

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

氧化应激指标：

• 超氧阴离子浓度：检测限0.05μM、线性范围0.1-10μM（参照ISO21427-1）
• 染色阳性率：≥75%细胞显示蓝色沉淀
• 反应速率：初始斜率≥0.02ΔOD/min

• 细胞存活率：阈值≥90%（依据GB/T16886.5）
• 膜完整性：染色渗透指数≤5%
• 增殖抑制率：计算值±2%误差

• 甲臜沉淀深度：光密度OD值0.1-1.5
• 背景校正因子：扣除率≥95%
• 标准曲线R²值：≥0.98

• 峰值时间：范围30-180秒
• 稳态浓度：维持≥15分钟
• 衰减速率：半衰期≥5分钟

• 染色均匀性：变异系数≤10%
• 损伤区域分布：定量评分1-5级
• 切片厚度：标准值10-20μm

• 缓冲液pH值：7.4±0.2
• 试剂纯度：NBT浓度≥98%
• 温度控制：37±0.5°C

• IC50值：计算精度±5μg/mL
• 抗氧化效能：抑制率≥50%
• 剂量效应曲线：斜率≥0.8

• 氧化胁迫指数：等级评定1-10
• 温度依赖系数：Q10值1.8-2.5
• 光照影响：强度阈值1000lux

• 相对活性：百分比偏差≤±3%
• 平行样一致性：CV≤8%
• 参考标准回收率：95-105%

• 空白对照OD值：≤0.05
• 重复性误差：RSD≤5%
• 系统校准频率：每日一次

检测范围

1.哺乳动物细胞培养物：HeLa、HEK293等细胞系，重点检测氧化应激响应和染色均匀性

2.植物组织样本：叶片、根茎切片，侧重损伤区域染色分布和胁迫耐受性

3.微生物悬浮液：细菌、酵母悬浮培养，检测超氧阴离子生成速率和抗菌效能

4.血液样品：全血或分离血浆，重点评估白细胞活性和自由基清除能力

5.器官切片：肝脏、肾脏冷冻切片，侧重组织特异性染色深度和病理变化

6.体外培养模型：3D细胞培养系统，检测微环境氧化状态和药物渗透影响

7.环境样本：水体或土壤提取液，重点测量污染物诱导的超氧阴离子水平

8.药物处理样品：化疗药物或抗氧化剂暴露细胞，评估IC50值和毒性机制

9.基因编辑细胞：CRISPR修饰细胞系，检测基因突变对自由基生成的影响

10.纳米材料暴露系统：纳米颗粒处理样品，侧重尺寸依赖的超氧阴离子释放

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价细胞毒性试验
• ISO21427-1:2006水质微生物诱变检测
• ASTME2523-13细胞活性标准测试方法

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价细胞毒性试验
• GB/T5750.12-2006生活饮用水标准检测方法微生物指标
• GB/T27818-2011化学品体外细胞毒性试验方法

检测设备

1.倒置显微镜：OlympusIX73（分辨率0.2μm，放大倍数40-1000×）

2.分光光度计：ShimadzuUV-2700（波长范围190-900nm，精度±0.001OD）

3.离心机：Eppendorf5424R（转速范围100-15000rpm，容量24×1.5mL）

4.恒温培养箱：MemmertIN75（温度范围5-60°C，精度±0.1°C）

5.微量加样器：EppendorfResearchPlus（量程0.1-1000μL，误差≤0.5%）

6.酶标仪：BioTekSynergyH1（检测通道6个，动态范围0-4OD）

7.细胞培养箱：ThermoScientificHeracell150i（CO2控制0-20%，湿度90%）

8.纯水系统：MilliporeMilli-Q（电阻率18.2MΩ·cm，产水量1.5L/h）

9.pH计：MettlerToledoSevenCompact（测量范围0-14pH，精度±0.01）

10.超净工作台：EscoAirstream（洁净度Class100，风速0.45m/s）

11.冷冻离心机：ThermoScientificSorvallST16R（温控-10-40°C，最大转速16000rpm）

12.移液枪：GilsonPipetmanL（精度±0.6%，量程0.2-1000μL）

13.灭菌器：Tuttnauer3870EA（温度121°C，压力15psi）

14.数据采集系统：NationalInstrumentsDAQ（采样率100kHz，通道16个）

15.计算机软件：ImageJ分析系统（兼容TIFF/JPEG，处理速度≥100图像/分钟）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质