心脏灌流心肌细胞炎症小体激活试验

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

炎症小体激活检测：

• NLRP3复合物组装检测：组装率≥85%、ASCspeck形成数（参照JBiolChem标准）
• caspase-1活性测定：活性≥20U/mgprot、活化率变化值（±10%）

• IL-1β释放量：浓度≥50pg/mL、释放动力学曲线（参照ELISA标准）
• IL-18释放量：浓度≥30pg/mL、半衰期计算

• MTT法细胞存活率：存活率≥70%、IC50值计算
• LDH释放率：释放率≤15%、坏死细胞比例

• NLRP3mRNA表达：相对表达量2-foldchange、qPCRCt值（参照GAPDH内参）
• 蛋白表达分析：Westernblot灰度值、条带强度比（≥1.5倍）

• ROS水平：荧光强度≥100AU、DCFH-DA法检测
• SOD活性：活性≥50U/mgprot、清除率计算

• AnnexinV阳性率：阳性率≤10%、流式细胞术分析
• TUNEL阳性细胞数：计数≥5个/视野、凋亡指数

• NF-κB激活：核转位检测、磷酸化水平（参照CellSignal标准）
• MAPK磷酸化：p38MAPK活性、ERK1/2比值

• 动作电位持续时间：APD90变化率（±20ms）、频率响应
• 心肌收缩力：峰值力≥10mN、松弛时间

• 保护率计算：保护率≥50%、剂量效应曲线
• 毒性阈值：EC50值≤100μM、安全窗口

• ATP含量：浓度≥5nmol/mgprot、耗氧率
• 乳酸产生量：产生量≤2mM、糖酵解指数

检测范围

1.离体大鼠心脏灌流模型：重点检测缺血-再灌注损伤下的炎症小体激活和细胞凋亡率变化

2.人心肌细胞原代培养：评估临床样本中IL-1β释放和药物敏感性，侧重病理模型验证

3.小鼠心肌细胞系：用于高通量筛选，检测NLRP3表达和氧化应激指标

4.转基因心肌细胞模型：如NLRP3敲除细胞，验证炎症小体作用机制和信号通路

5.猪心脏灌流系统：模拟大型动物生理条件，检测血流动力学变化和caspase-1活性

6.心肌组织切片：原位分析炎症小体激活，免疫组化检测复合物分布

7.干细胞分化心肌细胞：研究发育中炎症反应，侧重细胞活力评估和分化状态

8.药物处理样本：测试抗炎化合物效果，检测保护率和毒性阈值

9.病理模型样本：如糖尿病心肌病模型，评估慢性炎症和氧化应激累积

10.冷冻保存心肌细胞：分析保存条件对炎症反应影响，检测LDH释放和复苏率

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009体外细胞毒性试验方法
• ASTMF2315-18细胞培养标准指南
• ISO15189:2012医学实验室检测要求

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价
• GB/T37864-2019生物样本检测方法通则
• GB/T29471-2012细胞培养技术规范

检测设备

1.灌流系统：Langendorff装置型（灌流压力80-120mmHg，温度37℃）

2.倒置荧光显微镜：IX73型（分辨率0.2μm，放大倍数40-1000X）

3.流式细胞仪：FACSCantoII型（检测通道8个，流速12μL/min）

4.酶标仪：SynergyH1型（波长范围200-1000nm，精度±0.5%）

5.PCR仪：7500型（温度精度±0.1℃，循环数40）

6.Westernblot系统：Trans-BlotTurbo型（转印时间7min，电压25V）

7.细胞培养箱：Heracell150i型（CO2控制5%，湿度95%）

8.离心机：5810R型（转速范围100-15000rpm，容量4×100mL）

9.冷冻切片机：CM1950型（切片厚度5-40μm，温度-20℃）

10.电生理记录系统：PowerLab型（采样率10kHz，通道8）

11.分光光度计：UV-1800型（波长精度±0.3nm，范围190-1100nm）

12.微孔板洗涤器：ELx405型（洗涤体积50-300μL，精度±1%）

13.细胞计数器：CountessIIFL型（计数范围10^4-10^7cells/mL，荧光检测）

14.恒温摇床：Innova42型（转速30-300rpm，温度范围4-80℃）

15.液氮罐：CX100型（容量100L，保持时间>30天）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质