单纯疱疹病毒DNA定量试验

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

灵敏度指标：

• 检测限（LOD）：≤50copies/mL（参照CLSIEP17-A2）
• 最低检出浓度：≥95%阳性率（WHOISTH指南）
• 稀释系列验证：线性相关系数R²≥0.99

• 交叉反应测试：与VZV/CMV无交叉（阈值Ct值差异≥5）
• 非特异性扩增：阴性对照无信号（NTC控制）
• 同源性干扰：同源序列相似度≤80%

• 回收率测试：85%-115%（标准物质SRM2362a）
• 偏差分析：相对误差≤±10%
• 校准曲线验证：斜率1.0±0.1

• 批内精密度：CV≤5%（重复10次测量）
• 批间精密度：CV≤10%（不同操作员）
• 日内变异：标准差SD≤0.5Ct

• 动态范围：50-10^7copies/mL
• 线性拟合度：R²≥0.98（四参数逻辑模型）
• 高值钩状效应：无钩状（载量≤10^8）

• 样本稳定性：-80°C保存≤6个月（降解率≤5%）
• 试剂稳定性：2-8°C有效期12个月（活性损失≤10%）
• 冻融循环：≤3次（Ct偏移≤0.5）

• 血红蛋白干扰：≤200mg/mL无影响（△Ct≤0.3）
• 脂质干扰：甘油三酯≤1000mg/dL（信号抑制≤10%）
• 抗凝剂影响：EDTA/肝素兼容（△Ct≤0.2）

• 国际标准品：WHO1stIS（赋值一致性≥95%）
• 质控品检测：阳性对照Ct值18-22（SD≤0.3）
• 阴性对照：无扩增（Ct≥40）

• 诊断敏感性：≥95%（金标准对比）
• 诊断特异性：≥98%（健康对照组）
• 阳性预测值：≥90%（流行病学数据）

• 仪器一致性：不同设备间CV≤8%
• 软件分析：阈值设定偏差≤0.1Ct
• 数据传输：错误率≤0.01%

检测范围

1.血清样本：用于HSV急性感染诊断，重点检测病毒载量动态变化及阈值设定（LOD≤50copies/mL）。

2.血浆样本：抗凝处理样本，侧重肝素/EDTA干扰评估与载量定量准确性（回收率≥85%）。

3.全血样本：含白细胞组分，检测重点为细胞裂解效率与DNA提取回收率（偏差≤±10%）。

4.脑脊液样本：中枢神经系统感染诊断，强调低浓度检测（LOQ≤100copies/mL）及蛋白干扰排除。

5.疱疹液样本：皮肤黏膜病变采集，核心验证样本均质化处理与抑制物移除（抑制率≤5%）。

6.尿液样本：泌尿生殖感染监测，重点评估pH值影响与沉淀物清除（△Ct≤0.5）。

7.拭子样本：咽部/生殖道棉拭，检测聚焦采样载体干扰与DNA洗脱效率（回收率≥90%）。

8.组织样本：活检组织如皮肤或神经，重点检测匀浆处理与抑制剂控制（降解率≤8%）。

9.羊水样本：产前筛查应用，核心验证渗透压影响与低体积检测适应性（载量线性R²≥0.97）。

10.其他体液样本：如唾液或乳汁，检测重点为粘度调整与异源物质干扰（信号变异CV≤12%）。

检测方法

国际标准：

• CLSIEP17-A2检测限与定量限评估指南（样本量要求≥20replicates）
• ISO15189:2022医学实验室分子诊断要求（质控频率每日执行）
• WHOISTH病毒载量标准化方案（校准品赋值溯源至国际单位）
• 差异说明：CLSIEP17-A2强调概率模型，而ISO15189更重实验室体系，例如在质控点设置上CLSI要求多点验证，ISO侧重全流程控制。

• GB/T19438.1-2004病毒核酸荧光PCR检测方法（循环阈值设定40cycles）
• YY/T1256-2015体外诊断试剂稳定性评价（加速老化试验条件37°C）
• WS/T420-2013临床检验定量测定精密度指南（重复次数≥20）
• 差异说明：GB/T19438.1-2004规定标准曲线生成方法，与WHOISTH在模板稀释梯度上存在微小差异（如GB要求5点稀释，WHO建议7点）。

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪：ABI7500型（检测通道数：5通道，温度精度±0.1°C）

2.核酸提取仪：QIAcubeHT型（通量：96样本/批次，提取效率≥95%）

3.高速冷冻离心机：Eppendorf5427R型（转速范围：100-30000RPM，温度控制±1°C）

4.微量移液器：GilsonPIPETMANL型（量程：0.1-1000µL，校准误差≤0.5%）

5.生物安全柜：EscoA2型（气流速度：0.5m/s，HEPA过滤效率99.999%）

6.涡旋振荡器：IKAMS3型（转速：500-3000RPM，定时精度±0.1s）

7.恒温水浴槽：MemmertWNB14型（温度范围：室温-100°C，稳定性±0.2°C）

8.PCR板封膜机：Bio-RadMicroseal型（密封压力：10psi，透光率≥95%）

9.紫外分光光度计：NanoDropOne型（检测波长：260/280nm，精度±0.1ng/µL）

10.超低温冰箱：ThermoScientific902型（温度范围：-86°C，波动±2°C）

11.自动化液体处理系统：HamiltonSTARlet型（移液精度：CV≤1%，通量：384孔板）

12.数据采集分析软件：QuantStudioDesign&Analysis型（算法：ΔΔCt法，错误率≤0.05%）

13.离心浓缩仪：EppendorfVacufugePlus型（真空度：10mbar，浓缩时间≤30min）

14.电泳仪：Bio-RadPowerPac型（电压范围：50-500V，分辨率：1bp）

15.校准用温度计：Fluke1523型（精度：±0.01°C，量程：-80°C至300°C）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质