神经疾病诊断样本前处理

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

样本收集：

• 脑脊液采集：体积≥2ml（参照ISO15189）、采集时间点（发病后0-24h）
• 血液抽取：抗凝剂类型（EDTA/K2EDTA）、采血管规格（真空管10ml）
• 组织活检：取样尺寸（≤5mm³）、无菌操作（参照GB/T20468）

• 温度控制：冷冻温度（-80℃±2℃）、冷藏稳定性（4℃≤48h）
• 防腐处理：防腐剂浓度（NaN2≤0.02%）、避光要求（光强≤100lux）
• 运输条件：干冰维持（-70℃）、时间限值（≤72h）

• DNA纯度：OD260/280比值（1.8-2.0）、浓度阈值（≥20ng/μl）
• RNA完整性：RIN值（≥7.0）、提取效率（回收率≥90%）
• 污染物控制：蛋白残留（≤0.1μg/μl）、抑制剂检测（Ct值偏差≤1.0）

• 蛋白浓度：BCA法测定（灵敏度0.5μg/ml）、纯度（SDS-PAGE条带单一）
• 酶活性保留：保存缓冲液（Tris-HClpH7.4）、活性损失率（≤5%）
• 变性控制：尿素浓度（≤6M）、复性效率（≥95%）

• 神经元富集：离心速度（300×g±10%）、细胞存活率（≥98%）
• 血脑屏障模型：渗透性测试（TEER值≥200Ω·cm²）、培养时间（≤72h）
• 流式分选：标记抗体浓度（1μg/ml）、分选纯度（≥99%）

• 离心参数：转速（1000-5000rpm）、时间（5-30min）、g力控制（≤3000×g）
• 沉淀物回收：上清液移除（保留≤100μl）、沉淀干燥（湿度≤30%）
• 梯度离心：介质密度（1.077g/ml±0.001）、分层精度（误差≤5%）

• 膜过滤：孔径大小（0.22μm）、流速（1ml/min±0.1）
• 杂质去除：颗粒残留（≤0.1μm）、浊度控制（NTU≤1.0）
• 缓冲液交换：透析膜截留（MWCO10kDa）、体积变化（≤10%）

• DNase/RNase处理：酶浓度（1U/μg）、灭活温度（75℃±2℃）
• 蛋白酶K消化：时间（≤30min）、温度（55℃±1℃）
• 抑制剂添加：EDTA浓度（1mM）、活性验证（空白对照）

• 样本均一性：pH值（7.2-7.6）、渗透压（280-320mOsm/kg）
• 稳定性测试：反复冻融（≤3次）、降解率（RNA≤10%）
• 交叉污染：阴性对照（Ct值≥35）、阳性率（≥95%）

• 荧光标记：染料浓度（1μM）、标记效率（≥90%）
• 生物素化：摩尔比（1:10）、结合验证（ELISAOD≥0.5）
• 同位素标记：比活度（≥10Ci/mmol）、半衰期控制（参照GB/T29747）

检测范围

1.脑脊液样本：涵盖腰椎穿刺采集物，重点检测细胞计数、蛋白浓度和微生物污染，确保无菌处理用于神经炎症标志物分析。

2.全血样本：包括静脉采血样本，侧重抗凝剂兼容性、血细胞分离效率和血红蛋白干扰控制，用于基因组DNA提取。

3.血清/血浆样本：涉及离心分离后上清液，检测重点为凝血因子残留、脂质清除和抗体稳定性，适用于蛋白质组学研究。

4.脑组织活检：涵盖手术切除样本，重点检测固定时间（≤24h）、石蜡包埋均匀性和核酸降解率，用于神经病理学诊断。

5.神经细胞培养物：包括原代神经元培养，侧重培养基pH稳定性、细胞活力和支原体污染检测，用于体外毒性测试。

6.脑脊液外泌体：涉及超速离心富集物，检测重点为粒径分布（50-150nm）、标志蛋白表达和RNA含量，用于神经退行性疾病研究。

7.脑脊液细胞沉淀：涵盖离心后沉淀物，重点检测细胞完整性、背景杂质和DNA/RNA共提取效率，用于单细胞测序。

8.脑脊液过滤液：包括膜过滤后滤液，检测重点为微生物截留率、大分子去除和低丰度蛋白回收，用于生物标志物筛查。

9.冷冻神经组织：涉及液氮速冻样本，侧重冻融循环耐受性、冰晶形成控制和形态学保存，用于免疫组化分析。

10.脑脊液衍生化产物：涵盖标记或修饰后样本，检测重点为标记效率、副产物清除和功能活性保留，用于分子探针开发。

检测方法

国际标准：

• ISO15189:2022医学实验室质量和能力要求（强调样本标识唯一性）
• ISO17025:2017测试和校准实验室能力通用要求（覆盖设备校准差异）
• ISO20395:2019生物样本库质量和能力（侧重长期保存稳定性）
• ASTME2520-15核酸提取效率测定（规定回收率计算法）
• CLSIH18-A4血液样本处理指南（详述抗凝剂选择）

• GB/T20468-2006临床实验室设计指南（包含样本分区要求）
• GB/T29747-2013分子生物学样本前处理规范（规定离心参数）
• GB/T37864-2019生物样本库管理（差异说明：比ISO更严的温控精度）
• GB/T38502-2020诊断试剂盒样本处理（涵盖防腐剂限值）
• GB/T39143-2020细胞分离技术指南（差异说明：与ISO离心力单位换算）

检测设备

1.高速离心机：Eppendorf5430R型（转速范围100-15000rpm，温度控制-10℃至40℃）

2.分光光度计：ThermoNanoDropOne型（波长范围200-800nm，检测限0.1ng/μl）

3.PCR仪：Bio-RadCFX96型（温度精度±0.1℃，升降温速率5℃/s）

4.超低温冰箱：ThermoScientificForma900型（温度范围-86℃±1℃，容积900L）

5.生物安全柜：EscoAirstreamClassII型（风速0.3-0.5m/s，HEPA过滤效率99.99%）

6.自动核酸提取仪：QiagenQIAcube型（通量1-12样本，提取时间≤30min）

7.电泳系统：Bio-RadPowerPacBasic型（电压范围10-300V，电流0.01-0.5A）

8.冷冻干燥机：LabconcoFreeZone2.5型（冷阱温度-84℃，真空度≤0.1mbar）

9.流式细胞仪：BDFACSAriaIII型（激光波长488nm，检测通道18个）

10.恒温振荡器：IKAKS4000型（转速50-400rpm，温度范围4℃至80℃）

11.膜过滤装置：MilliporeStericup型（孔径0.22μm，流速范围0.1-1L/min）

12.微量天平：SartoriusCubisII型（量程0.001mg至220g，精度±0.001mg）

13.恒温水浴锅：MemmertWNB14型（温度精度±0.1℃，容积14L）

14.组织匀浆器：IKAT25型（转速100-25000rpm，功率300W）

15.pH计：MettlerToledoSevenExcellence型（测量范围0-14，精度±0.01）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质