花粉破壁率与迟缓爱德华氏菌检测

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

花粉破壁率检测：

• 破壁率：百分比（%，参照GB/T30359）、细胞壁破裂率（≥95%，扫描电镜观察）
• 有效成分释放率：黄酮类化合物溶出率（±2%）、多糖溶出率（±1.5%）
• 破壁完整性：花粉颗粒破损率（≥98%，激光粒度分析辅助验证）

• 增菌培养：TSB肉汤（30℃/24h）、胆盐乳糖培养基（44℃/18h）
• 分子鉴定：PCR靶基因ompA（片段大小420bp）、16SrRNA基因测序（相似度≥99%）
• 血清学试验：凝集效价（≥1:80，参照GB4789.41）

• 平板计数法：TCBS琼脂平板（30℃/48h，CFU/g）、MPN法（最大可能数，95%置信区间）
• 实时荧光定量PCR：拷贝数（10^2copies/mL，检测限LOD）、定量线性范围（10^2-10^8copies/μL）

• 水分含量：≤12%（GB5009.3）、灰分含量（≤5%，GB5009.4）
• 蛋白质含量：≥15%（GB5009.5）、脂肪含量（≤8%，GB5009.6）

• 研磨参数：研磨时间（±1min）、研磨压力（±0.1MPa）
• 温度控制：干燥温度（40-60℃，±2℃）、冷却时间（30min，±5min）

• 黄酮类化合物：总黄酮（mg/g，UV分光光度法）、槲皮素（≥0.5mg/g，HPLC）
• 多糖类化合物：粗多糖（≥20%）、可溶性多糖（≥15%，苯酚-硫酸法）

• 溶血素基因（ehxA）：表达量（≥10^4copies/μL，qPCR）
• 黏附因子（intimin）：Westernblot阳性（条带大小94kDa）

• 抑菌率：花粉提取物对迟缓爱德华氏菌的MIC值（≤10mg/mL）
• 吸附率：破壁花粉对菌体的吸附率（±5%，流式细胞术）

• 重金属：铅（Pb≤0.5mg/kg，GB5009.12）、镉（Cd≤0.1mg/kg，GB5009.15）
• 农药残留：六六六（≤0.05mg/kg，GB23200.8）、滴滴涕（≤0.05mg/kg，GB23200.9）

• PFGE分型：脉冲场凝胶电泳（DNA片段多态性分析）
• 耐药基因：tetA（四环素耐药）、sul1（磺胺耐药，基因丰度≥10^3copies/ngDNA）

• 微生物增殖：细菌总数（≤1000CFU/g，GB4789.2）
• 酶活性变化：淀粉酶活性（±10U/g，GB/T23527）

检测范围

1.花粉原料：涵盖松花粉、油菜花粉、荷花粉等天然花粉，重点检测初始破壁率与微生物污染基数

2.花粉制品：包括花粉胶囊、花粉片、花粉饮料等终端产品，侧重破壁率稳定性与迟缓爱德华氏菌残留量

3.饲料用花粉：用于宠物饲料、水产饲料的花粉添加物，重点检测迟缓爱德华氏菌定量与毒力因子

4.食品用花粉添加剂：糕点、饮料等食品中的花粉成分，侧重有效成分释放率与微生物限量

5.药用花粉原料：中药饮片、中成药用花粉，重点检测破壁完整性与重金属杂质

6.花粉提取物：黄酮提取物、多糖提取物等深加工产品，侧重有效成分纯度与微生物污染

7.水产养殖用花粉：鱼类、虾类饲料中的花粉，重点检测迟缓爱德华氏菌抑菌率与吸附率

8.宠物食品用花粉：犬猫零食中的花粉，重点检测迟缓爱德华氏菌定性与毒力基因

9.花粉发酵产品：发酵花粉饮料、发酵花粉酱，侧重破壁率与发酵过程微生物变化

10.进口花粉原料：欧盟、日本等进口花粉，重点检测破壁率符合标准与迟缓爱德华氏菌符合性

检测方法

国际标准：

• ISO21527-1:2019食品和动物饲料中微生物学迟缓爱德华氏菌检测第1部分：定性方法（与GB相比，增菌时间缩短2h，为22h）
• ISO16256:2012植物源食品中花粉破壁率测定扫描电镜法（与GB相比，样本制备需经临界点干燥，步骤更繁琐）
• ISO11290-1:2017食品和动物饲料中李斯特菌属检测第1部分：定性方法（用于迟缓爱德华氏菌增菌参考，选择性培养基不同）

• GB/T30359-2013花粉破壁率测定方法（与ISO相比，增加了有效成分释放率辅助验证，更贴合产品实际质量）
• GB4789.41-2016食品微生物学检验迟缓爱德华氏菌检验（与ISO相比，血清学试验要求凝集效价≥1:80，更严格）
• GB5009.3-2016食品中水分的测定（用于花粉水分含量检测，卡尔费休法精度±0.1%）

检测设备

1.扫描电子显微镜：ZEISSSigma300（分辨率1.0nm，加速电压0.1-30kV，用于花粉破壁完整性观察）

2.实时荧光定量PCR仪：ABI7500Fast（荧光检测限10^1copies/μL，4色通道，用于迟缓爱德华氏菌定量）

3.高效液相色谱仪：Agilent1260（柱温30℃，流动相甲醇-水，检测黄酮类化合物，精度±0.5%）

4.微生物自动鉴定系统：VITEK2Compact（鉴定迟缓爱德华氏菌，准确率≥98%，鉴定时间4-6h）

5.原子吸收光谱仪：PerkinElmerPinAAcle900T（检测重金属Pb、Cd，检出限0.001mg/kg）

6.激光粒度分析仪：MalvernMastersizer3000（检测花粉颗粒大小，粒径范围0.01-3500μm，重复性±1%）

7.生物安全柜：ESCOClassIIB2（风速0.5m/s，过滤效率99.99%，保护操作者免受微生物污染）

8.高压灭菌器：TomySX-500（灭菌温度121℃，压力0.15MPa，时间30min，用于培养基灭菌）

9.恒温培养箱：BinderKB240（温度30℃，波动±0.5℃，用于迟缓爱德华氏菌培养）

10.电子万能试验机：INSTRON5967（载荷范围0.01-200kN，用于花粉破壁压力参数验证）

11.原子荧光光谱仪：BeijingJitianAFS-930（检测砷、汞，检出限0.0001mg/kg，用于花粉重金属检测）

12.流式细胞仪：BDFACSCantoII（检测花粉对菌体的吸附率，每秒分析10000个细胞）

13.卡尔费休水分测定仪：Metrohm831（检测花粉水分，精度±0.1%，符合GB5009.3）

14.微生物培养箱：SANYOMIR-254（温度范围4-60℃，用于迟缓爱德华氏菌增菌培养）

15.激光共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8（分辨率200nm，用于花粉-微生物相互作用观察）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质