心脏灌流心肌细胞基因表达谱分析

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

基因表达量化：

• mRNA表达水平：Log2FC变化范围（±4.0），p值≤0.05（参照ENISO17025）
• miRNA表达谱：检测限≤0.01copies/μL，丰度偏差±10%

• 细胞凋亡率：凋亡指数≥20%（参照GB/T16886.5）
• 代谢活性：ATP含量≥5nmol/mg蛋白，线粒体功能评分（参照标准方法）

• 通路富集评分：NES值≥1.5，p值≤0.01
• 转录因子活性：结合位点预测准确率≥95%

• 甲基化水平：CpG岛覆盖率≥80%（参照ISO20391）
• 组蛋白修饰：H3K27ac丰度变化±15%

• 细胞因子表达：IL-6变化范围±50pg/mL（参照标准方法）
• 氧化应激标记：ROS水平≤100nM

• VEGF表达量：丰度变化±30%（参照GB/T30988）
• 血管密度评分：≥5vessels/mm²

• 动作电位时长：APD90变化±10ms（参照标准方法）
• 离子通道表达：Nav1.5丰度≥2.0fold

• IC50值：浓度偏差±0.1μM（参照ISO10993）
• 耐药基因表达：ABCB1丰度变化±25%

• 纤维化评分：胶原沉积面积≤5%（参照标准方法）
• 坏死比率：≤10%细胞数

• 特异性基因标记：灵敏度≥90%，特异性≥85%
• 预后关联评分：HR值≥1.2（参照标准方法）

检测范围

1.人类原代心肌细胞：涵盖健康与疾病样本，重点检测缺血再灌注损伤下的基因表达差异及细胞凋亡动力学

2.鼠类心肌细胞模型：包括C57BL/6等品系，侧重药物干预（如β-阻滞剂）对转录组的影响及电生理变化

3.干细胞分化心肌细胞：iPSC来源样本，检测分化效率相关基因（如NKX2-5表达≥80%）及功能成熟度指标

4.心脏组织切片：冷冻或石蜡包埋样本，聚焦原位杂交验证基因定位及区域特异性表达富集

5.灌流液处理细胞：暴露于模拟缺血缓冲液，评估pH变化诱导的应激响应基因及代谢通路失调

6.基因编辑心肌细胞：CRISPR/Cas9修饰样本，检测靶基因敲除效率（≥95%）及脱靶效应相关转录本

7.药物筛选模型：高通量药物处理细胞，重点分析剂量依赖性基因表达谱及毒性阈值响应

8.衰老心肌细胞：老年供体样本，侧重端粒酶活性相关基因及氧化损伤标记物的量化

9.心血管疾病模型：心衰或心肌病样本，检测病理标志物（如BNP表达变化±50%）及治疗响应预测

10.三维培养心肌组织：类器官或工程化组织，评估空间基因表达异质性及细胞-基质互作信号

检测方法

国际标准：

• ISO20391-1:2018细胞计数和活力分析方法（采用流式细胞术，差异：指定荧光染料浓度）
• ENISO10993-5:2009医疗器械生物学评价-细胞毒性试验（差异：培养时间缩短至24h）
• ASTME3135-18高通量测序数据分析框架（差异：read比对算法参数调整）
• ISO/IEC17025:2017测试和校准实验室能力要求（差异：数据验证流程）

• GB/T30988-2014生物样品中RNA提取和纯化方法（差异：裂解缓冲液组分优化）
• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验（差异：MTT法替代LDH法）
• GB/T34796-2017转录组测序技术规范（差异：测序深度要求≥30Mreads）
• GB/T27407-2010实验室质量控制规范（差异：内部校准频率）

检测设备

1.高通量测序仪：IlluminaNovaSeq6000（通量：20Breads/run，准确性≥99.9%）

2.实时荧光定量PCR仪：AppliedBiosystemsQuantStudio7（检测范围：0.1fg-10ng/μL，灵敏度：0.01copies）

3.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（激光配置：488nm/640nm，分辨率：0.1μm）

4.激光共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8（放大倍数：1000×，Z轴分辨率：0.5μm）

5.生物分析仪：AgilentBioanalyzer2100（RNA完整性数：RIN≥8.0，检测限：5pg）

6.微阵列扫描仪：AffymetrixGeneChipScanner3000（点阵密度：>1Mfeatures，信噪比≥30dB）

7.细胞灌流系统：HarvardApparatusPerfusionSet（流速精度：±0.1mL/min，温度控制：37±0.5°C）

8.电生理记录仪：AxonMultiClamp700B（采样率：50kHz，噪声水平：<1pA）

9.酶标仪：ThermoFisherVarioskanLUX（波长范围：200-1000nm，精度：±0.005OD）

10.超速离心机：BeckmanCoulterOptimaXE（最大转速：150,000rpm，g-force：>800,000g）

11.核酸提取仪：QIAGENQIAcube（处理量：1-96样本，回收率：≥90%）

12.低温储存箱：ThermoScientificForma-80°C（温度稳定性：±2°C，容量：700L）

13.细胞培养箱：MemmertINCOmed（CO₂控制：5±0.1%，湿度：95±5%）

14.生物反应器：SartoriusBIOSTATSTR（体积范围：50mL-50L，溶氧控制：20-100%）

15.图像分析系统：OlympuscellSensDimension（像素分辨率：4K×4K，处理速度：100fps）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质