免疫细胞活化分析

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

表面标记物表达分析：

• CD69检测：阳性细胞比例≥80%（参照ISO10993-22）
• HLA-DR上调：平均荧光强度比值≥2.0
• CD25表达：阳性率阈值≥60%

• IFN-γ水平：浓度≥50pg/ml（检测限0.1pg/ml）
• IL-2分泌：峰值浓度≥30pg/ml（参照ISO15194）
• TNF-α释放：浓度范围10-100pg/ml

• CFSE染色增殖指数：≥1.5（变异系数≤5%）
• BrdU掺入率：阳性细胞比例≥40%
• MTT比色法：吸光度OD值≥0.8

• NF-κB磷酸化水平：相对表达量≥1.8倍
• MAPK通路检测：p-ERK1/2活性比值≥1.5
• STAT蛋白活化：磷酸化STAT3水平≥2.0倍

• IFNG转录水平：Ct值≤28（参照ISO20395）
• IL2RAmRNA表达：倍数变化≥2.0
• FOXP3基因检测：相对定量≥1.5

• LDH释放率：细胞毒性指数≥20%
• 穿孔素表达：阳性细胞比例≥30%
• 颗粒酶B活性：酶活性单位≥100U/ml

• ATP含量测定：浓度≥1.0μM（检测限0.01μM）
• 葡萄糖摄取率：≥1.5倍基线水平
• 乳酸产量：浓度变化范围0.5-2.0mM

• Transwell迁移指数：迁移细胞数≥100/视野
• 趋化因子响应：CXCR4表达阳性率≥50%
• 伤口愈合率：愈合速度≥20μm/h

• AnnexinV阳性率：凋亡细胞比例≤10%
• Caspase-3活性：相对活性≤0.5倍
• 细胞存活率：活细胞比例≥90%

• CD80/CD86表达：MFI比值≥1.8
• ICOS水平：阳性细胞比例≥40%
• PD-1检测：表达阈值≤20%

检测范围

1.外周血单核细胞：重点检测T细胞和NK细胞活化标记物表达及细胞因子分泌动态

2.肿瘤浸润淋巴细胞：侧重分析肿瘤微环境中免疫细胞毒性功能和信号通路异常

3.脾脏淋巴细胞：聚焦B细胞活化状态和抗体分泌能力评估

4.骨髓造血干细胞：关注造血免疫细胞早期活化标志和增殖特性

5.淋巴结组织细胞：重点检测抗原提呈细胞共刺激分子表达和迁移响应

6.肠道固有层淋巴细胞：侧重黏膜免疫细胞因子分泌谱和代谢活性变化

7.胸腺T细胞前体：聚焦T细胞分化过程中的表面标记物时序表达

8.癌症患者血清样本：重点分析循环免疫细胞活化因子水平及临床相关性

9.干细胞衍生免疫细胞：侧重工程化细胞活化效能和基因编辑影响评估

10.自身免疫病组织样本：关注异常活化免疫细胞的凋亡抗性和通路活化特征

检测方法

国际标准：

• ISO10993-22免疫细胞表面标记物流式检测方法
• ISO15194细胞因子ELISA定量分析规范
• ISO20395实时荧光定量PCR基因表达检测标准
• ASTME2523细胞增殖MTT比色法执行指南

• GB/T37864流式细胞术免疫表型分析操作规程
• GB/T40976细胞因子酶联免疫吸附测定技术要求
• GB/T41591实时荧光定量PCR检测基因表达方法
• GB/T43212细胞毒性LDH释放试验标准

检测设备

1.流式细胞仪：BDAccuriC6Plus（检测通道6个，流速范围12-500μl/min）

2.酶标仪：ThermoMultiskanSkyHigh（波长范围340-850nm，精度±0.01OD）

3.实时荧光定量PCR仪：RocheLightCycler96（温控精度±0.1°C，通量96孔）

4.细胞培养箱：ThermoHeracellVIOS160i（温度范围30-50°C，CO2控制±0.1%）

5.倒置显微镜：OlympusIX73（放大倍数40-1000X，相机分辨率5MP）

6.超微量分光光度计：NanoDropOne（检测限0.2ng/μl，波长190-850nm）

7.多功能微孔板检测仪：BioTekSynergyH1（检测模式包括荧光、发光、吸光度）

8.离心机：Eppendorf5430R（转速范围100-15000rpm，温控精度±1°C）

9.蛋白电泳系统：Bio-RadMini-PROTEANTetra（凝胶大小8x10cm，电压范围10-300V）

10.细胞计数器：CountessIIFL（检测精度±3%，荧光通道3个）

11.冷冻切片机：LeicaCM1950（切片厚度1-100μm，温度范围-50°C至0°C）

12.生物安全柜：BakerSG603（气流速度0.4m/s，HEPA过滤器等级H14）

13.液氮储存罐：Taylor-WhartonCX1000（容量1000升，温度-196°C）

14.荧光显微镜：NikonEclipseTi2（激发波长365-640nm，相机灵敏度0.1lux）

15.细胞迁移分析系统：IbidiCulture-Insert2Well（孔径8μm，材料生物相容性符合ISO10993）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质