药品过敏反应细胞因子释放试验

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

细胞因子定量检测：

• 白细胞介素6（IL-6）：浓度范围0.1-1000pg/mL（参照ISO17025）
• 肿瘤坏死因子α（TNF-α）：检测限≤0.5pg/mL（参照FDA指南）
• 干扰素γ（IFN-γ）：动态范围5-500IU/mL

• 细胞活力：MTT法≥90%
• 凋亡率：流式检测≤5%
• 增殖指数：CFSE染色≥1.5倍

• CD3+T细胞比例：占比40-70%
• CD14+单核细胞表达：荧光强度≥1000MFI
• 活化标记CD69：阳性率≤10%（参照CLSIH42-A）

• 峰值时间点：刺激后6-48h
• 释放速率：斜率≥0.2pg/mL/h
• 半衰期计算：t1/2≤12h

• 浓度梯度设置：0.1-100μg/mL
• EC50值：计算药物半数效应浓度
• 最大释放量：IL-6≥50pg/mL

• 阳性对照：抗CD3抗体刺激响应≥80%
• 阴性对照：培养基背景≤2pg/mL
• 内参标准化：β-actin表达稳定

• PBMC分离纯度：≥95%
• 细胞计数：密度1×10^6/mL
• 冻存复苏存活率：≥85%

• 标准曲线R²≥0.99
• 变异系数CV≤10%
• 统计学显著性：p<0.05

• 批次间偏差：≤15%
• 试剂有效性：效期内使用
• 环境监控：CO2浓度5.0±0.2%

• 内毒素检测：≤0.25EU/mL（参照USP<85>）
• 无菌保证：培养阴性对照
• 细胞污染筛查：支原体阴性

检测范围

1.单克隆抗体药物：如抗CD28或抗PD-1抗体，检测重点为T细胞激活和IL-2释放峰值

2.疫苗制剂：mRNA或病毒载体疫苗，侧重评估佐剂诱导的TNF-α风暴风险

3.化疗药物：紫杉醇或多西他赛，关注中性粒细胞释放IFN-γ和细胞毒性

4.抗生素类：β-内酰胺类抗生素，检测单核细胞IL-6过度释放机制

5.免疫调节剂：如TNF抑制剂，重点分析反馈性细胞因子波动

6.镇痛药物：非甾体抗炎药，监测巨噬细胞TNF-α和COX-2通路

7.生物类似药：胰岛素或生长因子类似物，验证与原研药细胞因子谱一致性

8.基因治疗产品：AAV载体药物，评估载体介导的IL-1β释放动力学

9.中药注射剂：如参麦注射液，检测杂质诱导的补体激活和IL-8水平

10.诊断造影剂：碘化造影剂，侧重嗜碱性粒细胞组胺和IL-4关联分析

检测方法

国际标准：

• ISO10993-10医疗器械生物学评价-刺激与迟发型超敏反应试验（采用PBMC培养系统）
• ASTMF756-17材料溶血性能评估（延伸应用于细胞毒性定量）
• ICHS6(R1)生物技术药物临床前安全性评价（涵盖细胞因子释放试验规范）
• FDAGuidanceforIndustryImmunogenicityAssessment（规定释放阈值和报告格式）
• EP2.6.30欧洲药典-细胞因子检测方法（要求三批次重复验证）

• GB/T16886.10-2017医疗器械生物学评价-刺激与迟发型超敏试验（培养时间比ISO缩短24h）
• YY/T0127.14-2023口腔医疗器械生物学评价-细胞因子检测（增加ELISA验证步骤）
• GB/T37864-2019生物样品中细胞因子测定通则（使用国家标准品校准）
• GB/T36396-2023药物过敏性试验方法（侧重临床样本适用性）
• GB/T26125-2019细胞培养技术规范（规定CO2培养箱参数差异）

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSCantoII（检测通道数：8，激光波长488nm/640nm）

2.ELISA微板读取仪：ThermoMultiskanGO（波长范围：450-650nm，精度±1%）

3.CO2培养箱：ThermoFormaSeriesII（温度范围：30-40°C，CO2控制精度±0.1%）

4.生物安全柜：EscoAirstreamAC2-4S1（风速0.45m/s，HEPA过滤效率99.99%）

5.倒置显微镜：OlympusCKX53（放大倍数40-400×，相衬功能）

6.离心机：Eppendorf5810R（转速范围：100-15000rpm，容量4×100mL）

7.细胞计数仪：Bio-RadTC20（检测精度：±5%，样本量20μL）

8.酶标仪：BioTekSynergyH1（检测模式：荧光/发光，动态范围4个数量级）

9.液氮储存罐：Taylor-WhartonCX100（容量100L，温度-196°C）

10.PCR仪：AppliedBiosystems7500（热循环速度：4°C/s，孔位数96）

11.超低温冰箱：ThermoScientificForma-86°C（温度稳定性±2°C）

12.电化学发光仪：MesoScaleDiscoverySJianCeORS600（检测限：0.1pg/mL）

13.生物反应器：SartoriusBIOSTATB-DCU（搅拌速度10-1000rpm，体积控制±2%）

14.分光光度计：ShimadzuUV-2700（波长范围：190-900nm，分辨率0.1nm）

15.自动洗板机：BioTekELx405（清洗精度：CV≤3%，孔间差±5%）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质