内皮细胞完整性检测检测

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

屏障功能检测：

• 跨内皮电阻（TEER）：测量值（单位：Ω·cm²），渗透性系数（如FITC-dextran4kDa，参照ISO10993-5）
• 单层完整性评估：孔板渗透率（%after24h），荧光标记物清除率

• VE-cadherin表达：定量PCR相对表达量，免疫荧光定位评分
• ZO-1蛋白检测：Westernblot密度值（灰度单位），紧密连接覆盖率（%）

• CCK-8法活力：OD450值≥0.8，细胞存活率（%）
• EdU增殖检测：阳性细胞比例（%），细胞周期分析（G1/S/G2分布）

• IL-6水平：ELISA检测（pg/mL，参照ASTMF2721），TNF-α浓度（化学发光法RFU）
• ICAM-1表达：流式细胞术MFI值，基因表达调控倍数

• ROS水平：DCFH-DA荧光强度（相对单位），SOD活性（U/mg蛋白）
• NO生成量：Griess试剂法（μM），eNOS磷酸化状态

• AnnexinV/PI双染：早期凋亡率（%），晚期凋亡率（%）
• Caspase-3活性：荧光底物法（RFU/min），凋亡基因表达

• 划痕愈合：愈合率（%at48h），迁移速度（μm/h）
• Transwell迁移：穿过膜细胞数，基质侵袭指数

• eNOSmRNA：RT-qPCRCt值，相对表达量倍数
• NF-κB活化：Westernblot磷酸化水平，报告基因活性

• MAPK磷酸化：p-ERK/p-p38比值，WB密度量化
• PI3K/AKT通路：AKT磷酸化状态（相对强度）

• 血管生成能力：管腔形成长度（mm），分支点数
• 血栓调节蛋白：表面表达量（MFI），功能活性测试

检测范围

1.人类原代内皮细胞：涵盖脐静脉内皮细胞（HUVEC）和主动脉内皮细胞（HAEC），重点检测屏障功能和炎症响应变化。

2.动物模型内皮细胞：包括小鼠和大鼠主动脉内皮细胞，侧重药物毒性评估和病理状态模拟。

3.内皮细胞系：如EA.hy926或HMEC-1细胞，用于高通量筛选和标准化实验。

4.血管组织切片：人体或动物血管组织，通过免疫组化评估内皮完整性和蛋白定位。

5.生物材料涂层内皮化：支架或植入物表面内皮细胞，检测黏附率和屏障稳定性。

6.微流体芯片模型：微血管仿生系统，重点评估渗透性和流体剪切应力响应。

7.转基因细胞模型：基因编辑内皮细胞（如CRISPR敲除），分析特定基因对完整性的影响。

8.病理状态细胞：糖尿病或高血压患者来源内皮细胞，检测氧化应激和功能异常。

9.3D培养内皮细胞：球体或类器官模型，侧重三维屏障形成和细胞间相互作用。

10.共培养系统：内皮细胞与平滑肌细胞共培养，评估细胞间信号传导和屏障维持。

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5医疗器械生物学评价-细胞毒性试验
• ASTMF2721内皮细胞迁移测试方法
• ISO19001细胞培养通用要求

• GB/T16886.5医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
• GB/T38JianCe细胞活力检测方法
• GB/T39730基因表达分析技术规范

检测设备

1.跨内皮电阻测量仪：EVOM2型（测量范围0-20kΩ·cm²，精度±0.1%）

2.倒置荧光显微镜：OlympusIX73型（物镜10x-100x，CCD分辨率1920x1200）

3.酶标仪：BioTekSynergyH1型（波长范围200-999nm，检测通道8）

4.流式细胞仪：BDFACSCantoII型（激光488nm/640nm，流速60μL/min）

5.实时PCR仪：AppliedBiosystemsQuantStudio5型（热循环温度范围4-99°C，通道数6）

6.Westernblot系统：Bio-RadChemiDocXRS型（检测灵敏度0.1pg，动态范围4logs）

7.细胞培养箱：ThermoScientificHeraeus型（CO2控制5±0.2%，温度37±0.5°C）

8.微孔板阅读器：PerkinElmerEnSpire型（发光检测限0.01RLU，温控范围15-45°C）

9.透射电子显微镜：JEOLJEM-1400型（分辨率0.2nm，加速电压80kV）

10.离心机：Eppendorf5424R型（最大转速15,000rpm，温度控制-10-40°C）

11.冷冻切片机：LeicaCM1950型（切片厚度1-100μm，样本温度-20°C）

12.生物安全柜：EscoClassII型（气流速度0.45m/s，HEPA过滤效率99.99%）

13.细胞计数器：CountessIIFL型（自动聚焦精度±1μm，检测范围10^4-10^7cells/mL）

14.渗透性检测系统：MillicellERS-2型（孔径0.4μm，流量控制0.1-10mL/min）

15.血管成形设备：Matrigel培养系统（基质浓度8-12mg/mL，培养温度37°C）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质