心脏灌流心肌细胞钠钾泵活性分析

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

酶活性参数：

• 基础ATP酶活性：[活性单位μmolPi/mgprotein/h，参照ISO21473]
• 最大水解速率：[Vmax值，单位nM/min]
• 米氏常数：[Km值，单位mM]

• 钠离子流出速率：[μmol/min/mgprotein]
• 钾离子摄取效率：[比率%，参照GB/T30475]
• 膜电位变化：[ΔΨmmV]

• 乌本苷抑制率：[IC50值nM]
• 地高辛敏感性：[抑制百分比%]
• 特异性阻断测试：[EC50nM]

• ATP含量：[nmol/mgprotein]
• 乳酸脱氢酶释放：[活性U/L]
• 细胞存活率：[比率%]

• 膜流动性：[各向异性值]
• 脂质过氧化：[MDA含量nmol/mg]
• 蛋白氧化损伤：[羰基含量nmol/mg]

• 缺氧诱导变化：[活性变化%]
• 再灌注损伤响应：[恢复率%]
• 氧化应激耐受：[ROS水平RLU]

• 葡萄糖消耗速率：[μmol/min/mg]
• 乳酸生成量：[mM]
• 耗氧率：[nmolO2/min/mg]

• ATP1A1基因表达：[相对表达量]
• 亚基异构体分析：[比例%]
• 转录调控因子：[活性指数]

• 药物干预响应：[EC50nM]
• 毒性阈值：[LD50μM]
• 协同效应指数：[CI值]

• 泵密度：[分子数/μm²]
• 亚基构象变化：[荧光强度AU]
• 膜蛋白聚类：[聚类系数]

检测范围

1.离体灌流心肌组织：来自大鼠或兔心脏模型，重点检测泵活性基础值及灌流压力响应

2.原代培养心肌细胞：人源或动物源细胞，侧重单细胞水平离子转运效率和抑制剂筛选

3.心肌切片样本：冷冻或固定切片，聚焦膜完整性评估和局部活性分布

4.缺血性心肌模型：冠状动脉结扎样本，重点分析缺氧环境下泵功能障碍

5.再灌注损伤样本：恢复期心肌组织，检测氧化应激对活性恢复的影响

6.基因编辑细胞系：CRISPR修饰心肌细胞，侧重ATP1A基因突变响应

7.药物处理心肌样本：抗心律失常药暴露细胞，重点评估药效学参数变化

8.老化心肌组织：老年动物模型切片，聚焦泵活性衰减与膜流动性关联

9.心律失常相关样本：病变心脏灌流模型，检测电生理异常下的离子失衡

10.代谢综合征心肌：高糖或高脂诱导样本，侧重能量代谢与泵活性耦合分析

检测方法

国际标准：

• ISO21473:2018酶活性测定通用方法（采用比色法）
• ISO10993-5:2009体外细胞毒性测试（细胞存活率评估）
• ASTME2520-15膜电位测量规范（微电极技术）
• OECDTG471基因表达分析指南（qPCR参数）
• IUPAC离子选择性电极标准（钠钾离子浓度测定）

• GB/T30475-2020生物酶活性检测方法（ATP水解速率）
• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价（细胞毒性）
• GB/T5009.124-2016食品中酶活性测定（比色法扩展）
• GB/T3723-1999离子浓度电化学测量（缓冲液差异）
• GB/T19495.2-2004基因检测技术规范（表达量校准）

检测设备

1.分光光度计：ThermoScientificMultiskanGO（波长范围340-750nm，精度±0.005AU）

2.荧光显微镜：OlympusIX83（激发波长488nm，分辨率0.2μm）

3.高速离心机：Eppendorf5424R（最大转速15000rpm，温度控制±0.5°C）

4.微电极系统：WarnerInstrumentsFD223（阻抗≥10MΩ，采样率1kHz）

5.实时荧光定量PCR仪：Bio-RadCFX96（检测限0.1拷贝，动态范围10^6）

6.细胞培养箱：ThermoForma311（温度37°C±0.1°C，CO2控制5%）

7.液闪计数器：PerkinElmerTri-Carb4910TR（计数效率≥95%，背景≤50cpm）

8.电生理记录装置：MolecularDevicesAxon700B（膜片钳带宽10kHz，噪声<0.5pA）

9.质谱仪：WatersXevoTQ-S（分辨率30000，质量精度±0.001Da）

10.共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8（Z轴分辨率0.35μm，扫描速度12fps）

11.恒温振荡器：GrantInstrumentsPSU-10i（振幅25mm，转速50-300rpm）

12.pH计：MettlerToledoSevenExcellence（精度±0.001pH，温度补偿范围0-100°C）

13.渗透压计：AdvancedInstruments3320（测量范围0-2000mOsm/kg，精度±1mOsm）

14.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（检测通道18个，流速12μL/min）

15.图像分析系统：Image-ProPlus10.0（像素分辨率0.1μm，分析速度30fps）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质