生物标志物提取效率优化测试

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

提取效率评估：

• 提取率参数：目标标志物提取率≥95%（参照ISO21571）、回收率偏差±5%
• 优化条件验证：离心速度优化范围1000-15000rpm、缓冲液pH优化范围5.0-8.0

• 蛋白质纯度指标：A260:A280比值≥1.8、核酸杂质残留≤0.5%
• 样本残留物检测：脂质残留量≤2μg/mL、盐分残留偏差±0.1M

• 储存稳定性：-80°C下6个月提取率变化<10%、室温处理稳定性偏差±3%
• 冻融稳定性：反复冻融3次回收率≥90%、降解率≤5%

• 检测下限：LOD≤0.1ng/mL（蛋白质）、LOQ≤1ng/mL（核酸）
• 线性范围：动态范围1-1000ng/mL、相关系数R²≥0.99

• 交叉反应率：非目标分子干扰≤5%、抗体特异性偏差±2%
• 基质效应因子：基质因子范围0.8-1.2、内标校正RSD≤8%

• 精密度测试：日内精密度RSD≤10%、日间精密度RSD≤15%
• 批次一致性：多批次提取率差异≤5%、仪器漂移校正值±0.5%

• 固相萃取效率：吸附率≥98%、洗脱体积优化10-100μL
• 液液萃取效率：分配系数偏差±0.2、乳化风险评分≤3

• 空白对照：背景信号≤0.01AU、加标回收率95%-105%
• 平行样验证：重复样本差异≤3%、标准品偏差±2%

• 温度控制：提取温度范围4-37°C、恒温精度±0.5°C
• 时间优化：孵育时间10-60分钟、离心时间偏差±5秒

• 内源物质抑制：血红蛋白干扰阈值≤10%、胆红素影响因子≤1.5
• 外源污染物：溶剂残留量≤0.01%、塑料吸附率≤2%

检测范围

1.血浆样本：肝素或EDTA抗凝血浆，重点检测凝血因子去除效率和蛋白质标志物回收率。

2.血清样本：无抗凝剂血清，侧重纤维蛋白原残留评估和细胞因子提取优化。

3.全血样本：包含红细胞裂解影响，检测血红蛋白干扰和核酸提取纯度。

4.尿液样本：高盐分尿液，关注尿素去除率和代谢小分子回收率偏差。

5.组织样本：冰冻或石蜡包埋组织，重点优化匀浆条件和DNA/RNA完整性检测。

6.细胞培养液：含血清培养基，检测细胞碎片去除效率和生长因子提取率。

7.唾液样本：低蛋白浓度样本，侧重粘液干扰评估和口腔标志物灵敏度测试。

8.脑脊液样本：低体积高危样本，关注微量蛋白质提取效率和污染风险控制。

9.粪便样本：复杂基质样本，重点检测微生物干扰和代谢物回收率优化。

10.其他体液样本：如羊水或胸腹水，检测高脂质含量影响和稀有标志物提取可行性。

检测方法

国际标准：

• ISO15189:2022医学实验室生物样本处理要求
• ISO21571:2005食品安全核酸提取方法
• CLSIEP17-A2检测下限和定量下限评估指南
• ICHQ2(R1)分析方法验证规范
• AOAC991.09蛋白质提取效率测定

• GB/T37868-2019生物样本中核酸提取与纯化
• GB/T35824-2018蛋白质标志物检测通用要求
• GB/T33433-2016生物样本稳定性测试指南
• GB/T27401-2008实验室质量控制规范
• GB/T35400-2017小分子代谢物提取方法

检测设备

1.高速冷冻离心机：ThermoScientificSorvallLYNX6000型（转速范围100-25000rpm，控温-10°C至40°C）

2.液相色谱仪：WatersACQUITYUPLCH-Class型（流速范围0.001-5mL/min，检测波长190-800nm）

3.质谱仪：SciexTripleTOF6600型（分辨率>40000，质量精度<2ppm）

4.核酸提取仪：QiagenQIAcubeHT型（通量1-96Samples，提取时间10-60minutes）

5.紫外分光光度计：ShimadzuUV-2600i型（波长范围190-1100nm，精度±0.2nm）

6.蛋白纯化系统：GEHealthcareAKTApure25型（流速范围0.001-25mL/min，压力限5MPa）

7.恒温振荡器：EppendorfThermomixerC型（温度范围-10°C至100°C，振荡速度300-1400rpm）

8.自动化移液平台：HamiltonMicrolabSTARlet型（移液精度±0.5%，体积范围0.5-1000μL）

9.电泳系统：Bio-RadMini-PROTEANTetra型（电压范围10-500V，胶尺寸8x10cm）

10.冷冻干燥机：LabconcoFreeZone6型（温度-85°C，真空度<0.1mbar）

11.生物安全柜：EscoAirstreamAC2-4S1型（气流速度0.3-0.5m/s，HEPA过滤效率99.999%）

12.实时PCR仪：RocheLightCycler480II型（温控精度±0.1°C，荧光通道6）

13.均质器：BertinPrecellysEvolution型（转速500-10000rpm，冷却温度4°C）

14.pH计：MettlerToledoSevenExcellence型（测量范围0-14，精度±0.001）

15.显微镜：OlympusBX53型（放大倍数40-1000X，成像分辨率0.2μm）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质