EvansBlue细胞膜损伤定量分析

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

膜渗透性检测：

• EvansBlue吸收率：吸光度值（λ=620nm±5nm，参照ISO10993-5）
• 膜完整性评分：损伤指数≥0.5（阈值，基于细胞计数）
• 染料渗漏率：渗漏百分比（≤10%为正常范围）

• 细胞存活率：存活细胞比例（≥80%合格）
• 凋亡指数：caspase-3活性（单位U/mg）
• 膜电位变化：荧光强度差值（ΔF≥50）

• 损伤程度分级：轻度（1-3级）、中度（4-6级）
• 结合浓度：染料结合量（μg/mg蛋白）
• 时间依赖性损伤：损伤率（%/h）

• 细胞肿胀度：直径变化（μm）
• 膜破裂点：破裂细胞计数（个/视野）
• 染色均匀性：均匀度评分（1-5级）

• 半数抑制浓度：IC50值（μg/mL）
• 细胞毒性指数：毒性评分（≥5为显著）
• 增殖抑制率：抑制百分比（±5%）

• 神经元损伤模型：轴突断裂计数
• 缺血再灌注模型：再灌注损伤指数
• 药物暴露模型：暴露时间相关性

• 吸光度校准：标准曲线R²≥0.99
• 荧光淬灭校正：淬灭系数（k≤0.1）
• 背景扣除：背景值（OD≤0.05）

• 蛋白结合量：结合蛋白浓度（mg/mL）
• 氧化应激指标：ROS水平（相对单位）
• 膜脂质过氧化：MDA含量（nmol/mg）

• 重复性误差：RSD≤5%
• 灵敏度阈值：检测限0.01μg/mL
• 线性范围：0.1-100μg/mL

• 综合损伤评分：总分值（0-100）
• 相关性分析：相关系数（r≥0.8）
• 批次一致性：变异系数（CV≤10%）

检测范围

1.神经元细胞：涵盖原代神经元及细胞系，重点检测神经退行性疾病模型中的膜损伤及轴突完整性

2.肝细胞：包括HepG2等肝细胞模型，侧重药物肝毒性评估及代谢诱导膜损伤

3.心肌细胞：涉及心肌缺血再灌注模型，检测重点为缺氧后膜通透性变化及细胞凋亡

4.癌细胞：适用于多种癌细胞系，检测化疗药物诱导的膜损伤及耐药性关联

5.上皮细胞：如肠道或肺上皮细胞，重点评估屏障功能损伤及炎症反应影响

6.免疫细胞：包括巨噬细胞及淋巴细胞，侧重免疫激活后的膜完整性变化

7.干细胞：涵盖多能干细胞，检测分化过程中膜稳定性及损伤修复能力

8.细菌细胞：适用于革兰氏阴性及阳性菌，重点分析抗生素诱导的膜通透性改变

9.植物细胞：包括烟草细胞等模型，检测环境胁迫下的膜损伤响应

10.体外组织切片：如脑或肝组织切片，侧重原位膜损伤定量及空间分布分析

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2021体外细胞毒性试验方法
• ASTME2520-20光学吸收法测量细胞损伤
• ISO19001:2018染料结合定量分析规范

• GB/T16886.5-2022医疗器械生物学评价细胞毒性试验
• GB/T20240-2021细胞膜损伤检测技术规范
• GB/T5009.224-2023生化试剂定量分析方法

检测设备

1.紫外可见分光光度计：SHIMADZUUV-1900型（波长范围190-900nm，精度±0.002OD）

2.倒置荧光显微镜：OLYMPUSIX83型（物镜倍数40x-100x，分辨率0.2μm）

3.细胞培养箱：THERMOHERAcell150i型（温度控制±0.1℃，CO2浓度5±0.1%）

4.离心机：EPPENDORF5430R型（转速范围100-15000rpm，温控±1℃）

5.酶标仪：TECANInfiniteM200型（吸光度检测范围0-4.0OD，孔板兼容96/384孔）

6.流式细胞仪：BDFACSCantoII型（激光波长488nm，检测速率10000细胞/秒）

7.显微成像系统：LEICADMi8型（CCD分辨率5MP，时间序列捕获）

8.恒温摇床：NEWBRUNSWICKInnova44型（振荡范围25-300rpm，温控±0.5℃）

9.蛋白浓度测定仪：NANODROP2000型（样品量1-2μL，检测限0.02μg/μL）

10.低温高速离心机：SIGMA3-18KS型（转速30000rpm，温度范围-10℃至40℃）

11.细胞计数器：BIO-RADTC20型（计数精度±1%，大小范围5-60μm）

12.荧光分光光度计：VARIANCaryEclipse型（激发波长250-800nm，发射波长校正）

13.恒温水浴锅：MEMERTHWNB14型（温度范围室温至100℃，精度±0.1℃）

14.超净工作台：ESCOClassII型（气流速度0.3-0.5m/s，洁净度ISO5级）

15.电子天平：METTLERTOLEDOXS205型（量程0-200g，精度0.01mg）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质