酵母菌线粒体功能分析

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

形态学检测：

• 线粒体尺寸分析：平均长度（≥1.5μm）、平均宽度（≥0.5μm）（参照ISO13322-1）
• 密度评估：单位体积数量（≥50个/μm³）、形态异常率（≤10%）

• 膜电位测量：ΔΨm变化率（≥-20mV/min）、通透性指数（≤0.05）
• 离子通道活性：钙离子摄取速率（≥5μM/s）、钾离子外流抑制率（≤15%）

• ATP浓度测定：静态浓度（≥5μM/mg蛋白）、动态合成速率（≥50μmol/min/mg蛋白）
• 水解动力学：ATPase活性（≥0.8U/mg）、ADP/ATP比值（≤1.2）

• 复合物I活性：NADH脱氢酶活力（≥0.5mU/mg蛋白）、电子传递效率（≥80%）
• 复合物III功能：细胞色素c还原率（≥60μM/min）、Q循环效率（≥75%）

• 自由基水平：ROS生成量（≤10nM/min）、超氧阴离子浓度（≤5μM）
• 抗氧化能力：SOD酶活性（≥100U/mg）、GSH/GSSG比值（≥10）

• mtDNA拷贝数：相对拷贝数（≥50copies/cell）、缺失突变率（≤2%）
• 关键基因定量：COX1表达水平（≥2-fold）、ATP6转录量（≥1.5-fold）

• 氧消耗速率：基础呼吸率（≥100nmolO2/min/mg）、最大呼吸容量（≥150nmolO2/min/mg）
• 糖酵解评估：乳酸生成量（≤20μM/min）、葡萄糖消耗率（≥5μmol/min）

• 蛋白表达量：细胞色素c浓度（≥0.1ng/μg）、复合物V丰度（≥80%）
• 修饰状态分析：磷酸化位点检出率（≥90%）、乙酰化水平（≤15%）

• 胞内钙动态：钙振荡频率（≥0.5Hz）、峰值幅度（≥200nM）
• 线粒体钙负载：摄取容量（≥50μM）、释放速率（≥10μM/s）

• 细胞色素c释放：胞质浓度增幅（≤20%）、线粒体滞留率（≥80%）
• caspase活性：caspase-3激活水平（≤15%）、caspase-9切割率（≤10%）

检测范围

1.野生型酿酒酵母：标准实验室菌株，重点检测基础线粒体膜电位和ATP合成效率

2.呼吸缺陷突变体：rho0或petite突变菌株，侧重呼吸链复合物活性衰减和能量代谢障碍评估

3.衰老酵母细胞：对数后期或老化培养物，核心检测氧化应激累积和mtDNA完整性变化

4.药物干预样本：抗真菌剂或代谢抑制剂处理细胞，重点关注膜通透性异常和钙离子稳态失调

5.环境胁迫酵母：氧化应激或热休克诱导菌株，检测重点为ROS清除能力和ATP再生速率

6.不同生长阶段酵母：对数期与静止期细胞，评估线粒体密度动态和呼吸效率差异

7.mtDNA缺失株：线粒体基因组部分或全部缺失菌株，侧重基因表达补偿机制和凋亡信号激活

8.过表达转基因酵母：特定基因（如SOD2）过表达菌株，检测重点为抗氧化酶活性和复合物功能增强

9.工业发酵酵母：高产出菌株，核心评估糖酵解-氧化磷酸化耦合效率和耐受性指标

10.临床分离酵母：致病性菌株（如假丝酵母），侧重膜电位稳定性与药物敏感性关联分析

检测方法

国际标准：

• ISO21571:2022线粒体核酸提取与定量方法
• ISO10993-5:2021细胞毒性测试中膜电位评估规范
• ASTME2520-18生物样品ATP浓度荧光测定法

• GB/T37870-2021酵母线粒体呼吸链复合物活性检测规程
• GB/T39126-2020细胞氧化应激指标测定通则
• GB/T40123-2021微生物细胞内钙离子成像技术规范

检测设备

1.激光共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8型（分辨率≤0.2μm，激发波长范围400-700nm）

2.流式细胞仪：BDAccuriC6Plus型（检测速度≥10000细胞/s，荧光通道≥4个）

3.荧光分光光度计：HitachiF-7100型（波长精度±1nm，检测限≤0.01RFU）

4.ATP检测系统：PromegaGloMax型（灵敏度≥0.1nMATP，动态范围0.1-100μM）

5.实时PCR仪：Bio-RadCFX96型（温度均一性±0.1℃，扩增效率≥95%）

6.超速离心机：BeckmanOptimaXPN型（最大转速150000rpm，控温精度±0.5°C）

7.电化学分析仪：CHI760E型（电流分辨率≤1pA，电位范围±10V）

8.质谱仪：ThermoQExactive型（质量精度≤3ppm，扫描速率≥12Hz）

9.透射电子显微镜：JEOLJEM-1400型（放大倍数≤1000000×，点分辨率≤0.2nm）

10.氧消耗测定系统：SeahorseXFe96型（通量≥96孔，氧分辨率≤1μM）

11.钙离子成像系统：OlympusIX83型（成像速度≥30fps，灵敏度≤10nMCa²⁺）

12.酶标仪：TecanInfiniteM200型（吸光度范围0-4OD，温控精度±0.5°C）

13.蛋白纯化系统：GEAKTAPure型（流速范围0.01-100mL/min，UV检测波长190-740nm）

14.细胞破碎仪：SonicsVCX750型（功率输出50-750W，频率20kHz）

15.低温恒温槽：JulaboF32型（温度范围-20°C至100°C，稳定性±0.01°C）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质