菌株原始种子表达时序测试

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

基因表达分析：

• mRNA表达水平：foldchange、相对表达量（参照ISO20395:2019）
• 启动子活性：诱导倍数（如：≥10倍）、时序响应时间
• 拷贝数变异：偏差值（±0.5拷贝）

• 表达量测定：浓度（mg/L）、产率（如：≥50mg/g细胞）
• 纯度分析：杂质含量（≤0.1%）、聚集体比例
• 活性评估：比活度（U/mg，参照GB/T33419-2016）

• 比生长速率：μmax（h⁻¹）、倍增时间
• 生物量积累：干重（g/L）、OD600值（如：≥1.0）
• 代谢产物：副产物积累量（mmol/L）

• 遗传稳定性：突变频率（<10⁻⁶）、质粒保留率
• 表达一致性：变异系数（CV≤5%）
• 长期储存：活力恢复率（≥90%）

• 内毒素水平：EU/mL（如：≤0.1EU/mL）
• 宿主蛋白残留：ppm值（参照ISO13022:2012）
• 核酸残留：ng/mg蛋白

• 延迟期长度：Tlag（h）、指数期斜率
• 稳态维持：平稳期时长（h）、波动幅度
• 衰退分析：衰减速常数（k，h⁻¹）

• 温度响应：Q10值、热稳定性系数
• pH敏感性：最适pH偏差（±0.2）
• 溶氧影响：临界DO浓度（mg/L）

• 表达谱相似性：相关系数（R²≥0.95）
• 批次间差异：RSD（≤3%）
• 保存条件：冻存复苏率（如：≥85%）

• 诱导效率：诱导因子（如：≥20倍）
• 泄漏表达：基础表达率（≤1%）
• 响应时间：Tmax（min）

• 抗生素抗性：最小抑菌浓度（MIC）
• 致病性筛查：毒性因子表达量
• 环境释放风险：生存率（%）

检测范围

1.大肠杆菌工程菌株：涵盖BL21(DE3)等常用宿主，重点检测重组蛋白表达时序曲线及生长适应性

2.酵母表达系统：如毕赤酵母GS115，侧重糖基化修饰时序变化及甲醇诱导效率

3.枯草芽孢杆菌菌株：适用于酶制剂生产，检测孢子形成期表达波动及分泌效率

4.乳酸菌发酵种子：如乳酸杆菌，重点监控酸耐受性对表达稳定性的影响

5.丝状真菌孢子：如黑曲霉，检测萌发期基因表达激活及次级代谢产物积累

6.哺乳动物细胞种子：如CHO细胞，侧重贴壁/悬浮培养下的时序表达均一性

7.植物细胞培养物：如烟草BY-2细胞，关注激素诱导的阶段性表达变化

8.古菌种子批次：如嗜热菌，检测高温环境下的表达动力学及热休克响应

9.合成生物学构建体：如人工基因线路，重点验证时序逻辑门功能及噪音控制

10.环境微生物分离株：如土壤菌群，监测自然条件下表达适应性与竞争效应

检测方法

国际标准：

• ISO20395:2019分子体外诊断检测性能评估方法（用于基因表达定量）
• ISO13022:2012生物技术产品中宿主细胞蛋白检测指南（设定残留限值）
• ASTME3135-18微生物生长动力学标准测试方法（定义参数计算方法）

• GB/T33419-2016重组蛋白活性测定通则（规范比活度测试）
• GB/T35836-2018微生物菌种稳定性检测方法（规定遗传漂变评估）
• GB/T40210-2021生物反应器细胞培养过程监控要求（包括时序采样protocol）

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪：QuantStudio7Pro型（检测通道数：6，动态范围：10⁷）

2.蛋白纯化系统：AKTApure25型（流速范围：0.001-25mL/min，分辨率：±0.5%）

3.生物反应器：DASGIPParallelBioreactorSystem（控制参数：温度±0.1°C，溶氧±1%）

4.紫外分光光度计：NanoDropOneC型（波长范围：190-850nm，精度：±0.002AU）

5.流式细胞仪：BDFACSAriaIII型（检测速率：70000细胞/秒，激光线：488nm）

6.酶标仪：SpectraMaxi3x型（检测模式：荧光/发光/吸收，孔板数：384孔）

7.超高效液相色谱：WatersACQUITYUPLCH-Class（压力上限：15000psi，梯度精度：±0.1%）

8.冷冻离心机：Eppendorf5430R型（转速范围：100-15000rpm，温度控制：-20°C至40°C）

9.细胞计数器：Countess3FL型（计数精度：±2%，荧光通道：3）

10.微生物生长曲线分析仪：BioscreenC型（检测波长：405-600nm，样品容量：200孔）

11.质谱仪：ThermoQExactiveHF-X型（分辨率：240000，质量精度：<1ppm）

12.凝胶成像系统：Bio-RadChemiDocMP型（像素：520万，动态范围：4.8OD）

13.恒温摇床：INFORSHTMultitronPro型（振荡范围：25-300rpm，控温精度：±0.1°C）

14.电穿孔仪：Bio-RadGenePulserXcell型（电压范围：10-3000V，脉冲数：1-99）

15.荧光显微镜：OlympusIX83型（物镜放大：100×，相机分辨率：2048×2048像素）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质