蛋白组活性检测

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

酶活性检测：

• 催化效率测定：kcat值（单位s⁻¹）、米氏常数（Km，单位μM）（参照ISO 18153）
• 抑制活性分析：半数抑制浓度（IC50，单位nM）、抑制类型分类
• 酶动力学参数：最大反应速率（Vmax，单位μmol/min）、转换数（kcat/Km）

• 亲和力测定：结合常数（Kd，单位nM）、解离常数（koff，单位s⁻¹）
• 特异性分析：交叉反应率（≤5%）、饱和结合曲线
• 配体竞争试验：半数有效浓度（EC50，单位μM）

• 磷酸化水平：磷酸化位点丰度（相对单位）、激酶活性（单位pmol/min）
• 信号通路激活：下游效应物浓度变化（倍数差异≥2）、时间动力学曲线
• G蛋白偶联受体活性：cAMP生成量（单位pmol）、β-arrestin招募率

• 构象稳定性：熔解温度（Tm，单位°C）、自由能变化（ΔG，单位kJ/mol）
• 聚集倾向分析：浊度值（NTU）、粒径分布（D90≤100nm）
• 二硫键完整性：还原型/氧化型比例（≥90%）

• 蛋白酶解速率：半衰期（t1/2，单位h）、降解产物丰度
• 泛素化水平：泛素链长度（Ub2-Ub7）、去泛素化酶活性
• 自噬相关活性：LC3-II/LC3-I比值（≥1.5）、p62降解率

• 磷酸化修饰：磷酸化位点鉴定、修饰程度（摩尔比）
• 糖基化分析：糖型分布（主要糖型占比≥80%）、糖基化位点
• 乙酰化检测：乙酰化水平（相对丰度）、去乙酰化酶抑制率

• 结合强度：结合常数（Kd，单位nM）、协同因子效应
• 复合物形成：复合物稳定性（半衰期≥30min）、结合位点映射
• 竞争结合试验：抑制常数（Ki，单位μM）、选择性指数

• 米氏方程拟合：Vmax值（单位μmol/min）、Km值（单位μM）
• 抑制动力学：抑制常数（Ki，单位nM）、抑制模式分类
• 激活剂效应：激活常数（Ka，单位μM）、最大激活率

• 结合亲和力：Kd值（单位pM）、效价（滴度≥1:1000）
• 中和活性：中和抗体滴度（单位IU/mL）、半数中和浓度（ND50）
• Fc功能检测：ADCC活性（裂解率≥50%）、CDC效价

• 热稳定性：Tm值（单位°C）、变性焓变（ΔH）
• 化学稳定性：变性剂中点浓度（Cm，单位M）、pH稳定性范围
• 冻融稳定性：活性保留率（≥95%）、聚集颗粒数

检测范围

1. 血清样本： 包括人血清和动物血清，检测重点为炎症标志物活性（如C反应蛋白酶活性）及抗体中和能力。

2. 细胞裂解液： 涵盖肿瘤细胞和干细胞裂解物，重点检测信号转导通路激活状态及激酶磷酸化水平。

3. 组织匀浆： 涉及肝脏和脑组织样本，检测重点为代谢酶活性变化及蛋白质降解速率。

4. 重组蛋白制剂： 包括表达纯化的酶和受体，重点检测催化效率、结合亲和力及构象稳定性。

5. 酶制品： 涵盖工业酶和诊断酶，检测重点为比活性（单位U/mg）及抑制剂敏感性。

6. 抗体药物： 包括单克隆抗体和双特异性抗体，重点检测抗原结合活性、Fc效应功能及稳定性。

7. 疫苗样品： 涉及病毒载体和亚单位疫苗，检测重点为抗原免疫原性及佐剂增强的酶活性。

8. 生物制品： 包括细胞治疗产品和基因疗法制剂，重点检测蛋白质修饰依赖活性及降解产物。

9. 食品蛋白提取物： 涵盖乳制品和植物蛋白，检测重点为消化酶抗性及过敏原活性。

10. 环境样品中的蛋白质： 包括水体和土壤提取物，重点检测微生物酶活性及污染物结合能力。

检测方法

国际标准：

• ISO 18153:2003 体外诊断医疗器具酶活性测量方法
• ASTM E2520-15 蛋白质结合活性测定标准指南
• ISO 10993-18:2020 生物材料中蛋白质修饰检测
• ASTM E2867-14 酶动力学参数测试标准

• GB/T 16886.18-2011 医疗器械生物学评价蛋白质吸附试验
• GB/T 5009.124-2016 食品中蛋白质活性测定方法
• GB/T 30975-2014 生物制品中抗体活性检测
• GB/T 35430-2017 蛋白质稳定性试验方法

检测设备

1. 紫外-可见分光光度计： Shimadzu UV-2600i（波长范围190-1100nm，分辨率0.1nm）

2. 荧光光谱仪： Horiba Fluoromax-4（激发波长200-800nm，检测限0.1nM）

3. 高效液相色谱仪： Agilent 1260 Infinity II（流速范围0.001-10mL/min，压力上限600bar）

4. 质谱仪： Thermo Q Exactive HF-X（质量精度<1ppm，分辨率140000）

5. 酶标仪： BioTek Synergy H1（检测模式多，包括荧光和发光，孔板兼容1536孔）

6. 圆二色光谱仪： Jasco J-1500（波长范围185-2600nm，温度控制±0.1°C）

7. 表面等离子共振仪： Biacore 8K（流速范围1-100μL/min，检测限0.1RU）

8. 等温滴定量热仪： MicroCal PEAQ-ITC（温度范围2-80°C，灵敏度0.1μcal/s）

9. 动态光散射仪： Malvern Zetasizer Pro（粒径范围0.3nm-10μm，温度精度±0.1°C）

10. 核磁共振谱仪： Bruker Avance NEO 600MHz（场强14.1T，探头灵敏度高）

11. 电化学工作站： CHI760E（电流范围±250mA，扫描速率0.001-1000V/s）

12. 蛋白纯化系统： AKTA pure 25（流速范围0.001-25mL/min，UV检测波长254nm）

13. 生物反应器： Sartorius Biostat B（控制参数pH、DO、温度，容量1-10L）

14. 流式细胞仪： BD FACSAria III（激光配置488nm、640nm，分选速率70000事件/秒）

15. 微量热泳动仪： NanoTemper Monolith（温度范围4-40°C，检测限1nM）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质