脂肪分解酶活测试

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

酶活性定量：

• 水解速率测定：初始反应速率Vmax（μmol/min·mg，参照ISO 6803），比活力（U/mg蛋白）
• pH-活性谱：最适pH值（精度±0.1），pH稳定性（残留活性≥80%）
• 温度-活性谱：最适温度（℃），热稳定性（半衰期t1/2≥1h）

• 米氏常数：Km值（mmol/L，橄榄油乳化液底物）
• 催化常数：Kcat值（s⁻¹），特异性常数Kcat/Km

• 短链甘油三酯水解率（C4-C8，相对活性≥90%）
• 中长链甘油三酯水解率（C12-C18，参照AOCS Cd 3-25）

• 金属离子影响：Ca²⁺/Zn²⁺存在下活性保留率（±5%）
• 表面活性剂耐受：SDS/Tween-80存在下活性保留率（≥85%）

• 极性溶剂稳定性：甲醇/乙醇中残留活性（浓度10% v/v）
• 非极性溶剂稳定性：正己烷/异辛烷中残留活性（浓度20% v/v）

• 界面结合常数：Kd值（mM⁻¹，乳化橄榄油体系）
• 乳液水解效率：粒径变化率（D50下降≥40%，激光衍射法）

• 活化能：Ea值（kJ/mol，Arrhenius方程拟合）
• 变性焓变：ΔH值（kJ/mol，差示扫描量热法）

• 脂肪酸抑制常数：Ki值（mmol/L，油酸添加实验）
• 甘油抑制阈值：活性下降≤10%的甘油浓度（w/v）

• 重复使用性：固定化酶循环10次活性保留率（≥70%）
• 储存稳定性：4℃/25℃下活性半衰期（t1/2≥180天）

• 杂酶检测：蛋白酶残留（≤0.1 U/mg，AZOCasein法）
• 磷脂酶活性：磷脂水解率（≤2%，TLC法）

检测范围

1. 动物源脂肪酶： 猪胰脂肪酶、牛舌脂肪酶，重点检测热稳定性及胆盐依赖性

2. 微生物发酵液： 黑曲霉、假丝酵母发酵粗酶液，侧重pH耐受性及底物谱广谱性

3. 基因工程酶制剂： 重组表达脂肪酶，验证最适温度偏移及催化效率倍增效应

4. 食品工业用酶： 乳制品/油脂加工酶，检测重金属残留（Pb≤5ppm）及毒素阴性

5. 洗涤剂用酶颗粒： 包衣酶制剂，评估低温（15℃）活性及氧化剂耐受性（过硼酸盐）

6. 固定化酶载体： 树脂/磁性纳米颗粒负载酶，分析载体结合率（≥95%）及扩散限制效应

7. 药用脂肪酶： 肠溶胶囊制剂，检测胃酸环境失活率（pH2.0活性≤5%）

8. 生物柴油催化剂： 转酯化用脂肪酶，监控甲醇耐受性（50% v/v活性保留）

9. 诊断用酶试剂： 血清甘油三酯检测酶，验证线性范围（0.05-10 mmol/L）

10. 皮革处理酶： 脱脂用酸性脂肪酶，检测胶原蛋白损伤率（≤3%）

检测方法

国际标准：

• ISO 6803:2017 动物和植物脂肪和油 - 脂肪酶活性的测定（滴定法）
• AOAC 991.22 食品中脂肪酶活性（对硝基苯基月桂酸酯法）
• ASTM D6751 Annex A4 生物柴油催化剂脂肪酶活性（甘油释放量GC法）

• GB 1886.174-2016 食品安全国家标准 食品添加剂 脂肪酶（pH-stat法）
• GB/T 23535-2009 脂肪酶制剂（橄榄油乳化液水解滴定法）
• YY/T 1674-2019 医用脂肪酶活性测定（酶偶联比色法）

检测设备

1. pH-Stat自动滴定系统： METTLER T50（滴定精度±0.001 mL，温度控制±0.1℃）

2. 紫外可见分光光度计： SHIMADZU UV-1900i（波长范围190-1100nm，带宽1nm）

3. 恒温振荡反应器： INFORS HT Multitron Pro（温度范围4-80℃，振荡精度±1rpm）

4. 高效液相色谱仪： WATERS e2695（C18色谱柱，ELSD检测器）

5. 气相色谱仪： AGILENT 8890（FID检测器，毛细管柱DB-WAX）

6. 酶标仪： TECAN Infinite M200 Pro（波长精度±1nm，温控37±0.5℃）

7. 激光粒度分析仪： MALVERN Mastersizer 3000（测量范围0.01-3500μm）

8. 差示扫描量热仪： TA Q200（温度范围-90-550℃，灵敏度0.2μW）

9. 恒温金属浴： SCILOGEX SC-100（控温精度±0.3℃，孔间温差≤0.5℃）

10. 超低温离心机： EPPENDORF 5430R（最大转速15000rpm，温控-10-40℃）

11. 纳米粒度电位仪： BROOKHAVEN ZetaPALS（Zeta电位测量范围±300mV）

12. 旋转蒸发仪： BUCHI R-300（真空度≤5mbar，水温控制±2℃）

13. 凯氏定氮仪： FOSS Kjeltec 8400（氮测定范围0.1-240mgN）

14. 电导率仪： METTLER TOLEDO SevenExcellence（测量范围0-2000mS/cm）

15. 恒湿热培养箱： BINDER KBW（温度范围5-70℃，湿度范围10-98%RH）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质