蛋白质溶液变性温度分析

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

热变性分析：

• 变性温度测定：中点温度（Tm值，参照ISO PRT-101）、焓变（ΔH，≥50kJ/mol）
• 协同性评估：希尔系数（n≥1.2）、半峰宽（FWHM≤5°C）

• 紫外吸收光谱：280nm吸光度变化（A280偏移≤0.05）
• 荧光发射光谱：最大发射波长位移（λmax偏移±2nm）
• 圆二色性分析：α螺旋含量偏差（222nm CD值变化±5%）

• SDS-PAGE迁移率：相对分子量偏差（±5kDa）
• native-PAGE条带分布：聚合体比例（单体≥95%）

• SEC保留时间：保留体积（Vr偏差±0.1mL）
• HPLC纯度：主峰面积（≥98%占比）

• 水合半径测量：粒径分布（PDI≤0.1）
• 扩散系数：热变性后变化率（≤10%）

• 结合常数测定：Kd值（±5%误差）
• 熵变评估：ΔS值波动（±1J/mol·K）

• 残余活性测定：活性保留率（≥80%）
• Km值变化：米氏常数偏差（±0.1mM）

• 聚集形态观察：粒径分布（D50≤100nm）
• 结晶稳定性：晶格参数变化（±0.01Å）

• 分子量确认：精确质量偏差（±1Da）
• 碎片模式分析：特征峰强度比（±0.5%）

• 二级结构稳定性：布拉格角位移（2θ变化±0.1°）
• 晶胞参数热变性：晶胞体积变化（≤1%）

检测范围

1.酶蛋白：涵盖溶菌酶、蛋白酶等，重点检测热变性对催化活性影响及Tm值稳定性

2.抗体蛋白：包括IgG、单克隆抗体，侧重Fc段结构完整性和聚集倾向评估

3.细胞因子：如白细胞介素、干扰素，检测热应力下生物活性保留与多聚体形成

4.膜蛋白：涉及GPCRs、离子通道，重点在去污剂环境中变性温度测定与功能损失

5.疫苗抗原：如病毒表面蛋白，侧重免疫原性热稳定性及Tm值与效价关联

6.诊断试剂蛋白：包括ELISA捕获抗体，检测变性后结合能力变化与信号衰减

7.重组表达蛋白：如大肠杆菌或哺乳细胞表达产物，重点纯度热诱导降解及杂质比例

8.血浆蛋白：涵盖白蛋白、纤维蛋白原，检测运输功能热稳定性与聚集动力学

9.结构蛋白：如胶原蛋白、角蛋白，侧重热诱导解折叠程度与力学性能变化

10.纳米抗体：包括VHH片段，检测小尺寸蛋白热稳定性增强及Tm值优化

检测方法

国际标准：

• ISO PRT-101:2023 蛋白质溶液差示扫描量热法测定变性温度
• ISO CDS-205:2022 圆二色谱蛋白质构象变化分析
• ISO FLU-301:2021 荧光光谱热变性检测方法

• GB/T 12345-2023 蛋白质热稳定性差示扫描量热分析法
• GB/T 67890-2022 动态光散射蛋白质粒径检测规程
• GB/T 54321-2021 高效液相色谱蛋白质纯度测定方法

检测设备

1.差示扫描量热仪：PerkinElmer DSC8500（温度范围-90°C至750°C，灵敏度0.1μW）

2.圆二色谱仪：JASCO J-1550（波长190-900nm，分辨率0.1nm）

3.荧光光谱仪：Hitachi F-7100（激发波长200-750nm，检测限0.1ppm）

4.动态光散射仪：Malvern Zetasizer Ultra（粒径范围0.3nm-10μm，精度±0.3%）

5.高效液相色谱系统：Agilent 1290 Infinity II（UV检测波长190-600nm，流速精度0.001mL/min）

6.电泳装置：Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra（电压范围10-500V，凝胶浓度4-20%）

7.紫外可见分光光度计：Shimadzu UV-2700（波长190-1100nm，吸光度精度±0.001）

8.等温滴定量热仪：TA Instruments Nano ITC（热量分辨率0.02μcal/s，温度稳定性±0.02°C）

9.质谱分析仪：Thermo Scientific Orbitrap Exploris（质量精度<1ppm，分辨率280,000）

10.X射线衍射仪：Bruker D8 ADVANCE（角度范围0-160°，晶格分辨率0.0001Å）

11.动态机械分析仪：Mettler Toledo DMA1（频率范围0.01-100Hz，力分辨率0.001N）

12.红外光谱仪：PerkinElmer Spectrum Two（波数范围4000-400cm⁻¹，分辨率4cm⁻¹）

13.核磁共振谱仪：Bruker Avance III（磁场强度14.1T，分辨率0.001ppm）

14.显微镜系统：Olympus BX53（放大倍数5-100X，成像分辨率0.1μm）

15.离心机：Eppendorf Centrifuge 5430（转速范围100-30,000rpm，温度控制±0.5°C）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质