粪大肠菌群计数实验

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

样品制备：

• 稀释梯度：稀释因子1:10～1:10^6（参照ISO 7899-2）
• 样品体积：过滤法100mL，MPN法50mL系列
• 均匀性控制：搅拌时间≥30秒（偏差<5%）

• 温度控制：44.5±0.5°C（ISO 9308-1）
• 培养时间：24±2小时（极限范围18-48小时）
• 培养介质：m-FC琼脂基（产酸指示）

• 菌落计数：CFU/mL（计数精度≥95%）
• MPN指数：95%置信区间计算（参照FDA BAM）
• 计数阈值：典型菌落≥20个/板（直径0.5-1.5mm）

• 吲哚试验：阳性率≥80%（加柯瓦克试剂变色）
• 乳糖发酵：产酸产气阳性（参照FDA方法）
• 革兰氏染色：阴性杆菌（标准形态）

• 空白对照：无菌生长（合格标准）
• 阳性对照：大肠杆菌ATCC 25922（生长率≥90%）
• 回收率测试：标样回收85-115%

• 重复性：RSD≤10%（三次平行）
• 检出限：最低1 CFU/100mL（参照ISO 17994）
• 干扰排除：样品预处理去除悬浮物

• 结果表达：CFU/100mL或MPN值
• 单位转换：log10变换（精度±0.1）
• 不确定性：±5%置信区间

• 湿度控制：70-80%RH（培养箱内）
• 光照要求：避光培养（防止光解）
• 气流管理：无尘环境（粒子≤100/㎡）

• β-半乳糖苷酶：阳性反应（显色法）
• 氧化酶测试：阴性（排除假阳性）
• 耐热性：44.5°C生长确认

• 统计处理：泊松分布拟合（P≥0.05）
• 异常值剔除：Grubbs测试（α=0.05）
• 报告格式：数值表格化（ISO 5725）

检测范围

1. 饮用水：涵盖自来水及瓶装水，检测重点为总大肠菌群限值（<1 CFU/100mL），确保安全饮水标准符合性

2. 废水：处理厂进出水及工业排水，检测重点为污染物去除率评估（细菌负荷>10^4 CFU/mL）

3. 食品：包括生鲜果蔬、乳制品及肉类，检测重点为表面污染控制（限值<100 CFU/g）

4. 土壤：农田及污染场地，检测重点为粪便残留指示（检出限1 CFU/g干重）

5. 海水：海滨浴场及养殖区，检测重点为卫生风险监测（限值<200 CFU/100mL）

6. 饮料：果汁及碳酸饮品，检测重点为加工过程灭菌效果（无菌要求）

7. 化妆品：乳液及洗手液，检测重点为微生物安全（限值<10 CFU/g）

8. 饲料：动物饲料原料，检测重点为储存污染控制（限值<1000 CFU/g）

9. 空气：洁净室及医院环境，检测重点为沉降菌监测（CFU/㎡）

10. 沉积物：河流及湖泊底泥，检测重点为长期污染累积（检测浓度>10^2 CFU/g）

检测方法

国际标准：

• ISO 9308-1:2018 水质 - 大肠菌群、耐热大肠菌群计数（膜过滤法）
• ISO 7899-2:2000 水质 - 大肠菌群检测（MPN法）
• ISO 16649-2:2001 食品和动物饲料 - 大肠杆菌计数（确认测试）
• ISO 17994:2014 水质 - 微生物方法等效性评估（回收率计算）
• ISO 4833-1:2013 食品微生物学 - 菌落计数（通用计数原则）
• ISO 7218:2007 微生物学 - 通用要求和指南（质量控制）
• ISO 11133:2014 培养基制备（培养介质要求）
• ISO 5725-2:2019 准确度测定（统计处理）
• ISO 6579-1:2017 沙门氏菌检测（干扰排除参考）
• ISO 6887-1:2017 样品制备（稀释梯度设定）

• GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 - 微生物指标（膜过滤法）
• GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 - 大肠菌群计数（MPN法）
• GB 17323-1998 瓶装饮用纯净水卫生标准（限值要求）
• GB/T 18204.4-2013 公共场所卫生检验方法 - 空气微生物（沉降菌计数）
• GB/T 14643.1-2009 水质 - 大肠菌群测定（多管发酵法）
• GB 5009.267-2016 食品安全国家标准 - 食品微生物检验（确认测试）
• GB/T 12763.4-2007 海洋调查规范 - 生物要素（沉积物检测）
• GB/T 23743-2009 饲料中微生物检验（饲料污染控制）
• GB/T 16294-2010 医药工业洁净室沉降菌测试（空气监测）
• GB/T 18204.9-2000 化妆品微生物检验（无菌要求）

检测设备

1. 恒温培养箱：HT-4500型（温度范围30-50°C，精度±0.1°C）

2. 膜过滤装置：MF-200型（孔径0.45μm，流速100mL/min）

3. 菌落计数器：CC-300型（自动计数功能，分辨率0.1mm）

4. 高压灭菌器：AS-120型（压力121kPa，温度121°C）

5. 生物安全柜：BC-1000型（洁净度Class 100，气流0.5m/s）

6. 显微镜：OM-500型（放大倍数100-1000X，LED光源）

7. pH计：PH-800型（测量范围0-14，精度±0.01）

8. 振荡器：SH-250型（转速50-300rpm，振幅10mm）

9. 稀释分配器：DD-150型（精度±1%，容量1-100mL）

10. 恒温水浴锅：WB-350型（温度控制30-100°C，±0.5°C）

11. 自动接种器：AI-400型（接种量0.1-1mL，误差<2%）

12. 分光光度计：SP-600型（波长范围300-800nm，精度±1nm）

13. 生化反应板：BRP-100型（96孔设计，用于IMViC测试）

14. 离心机：CF-3000型（转速5000rpm，容量50mL）

15. 样品均质器：HG-200型（转速20000rpm，容量250mL）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质