PCR反应溶液灵敏度检测

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

灵敏度分析：

• 最低检测限（LOD）：<10copies/μL（参照ISO15189:2012）
• 定量限（LOQ）：<50copies/μL（精度±5%）
• 扩增效率：90%-110%（偏差值±2%）

• 非目标序列交叉反应：无交叉（特异性>95%）
• 同源性测试：序列匹配度≥98%（参照ISO13485:2016）
• 背景噪声控制：信噪比≥3:1

• 批内变异系数（CV）：≤5%（重复次数n=10）
• 批间变异系数：≤10%（参照GB/T19495.2-2004）
• 扩增一致性：Ct值标准差≤0.5

• 动态范围：10^1-10^9copies/μL（线性R²≥0.99）
• 浓度梯度响应：斜率0.9-1.1
• 稀释线性：回收率85%-115%

• 抑制剂耐受性：血红蛋白≤5mg/mL（抑制率<10%）
• EDTA影响：浓度≤10mM（参照ISO17025:2017）
• 乙醇残留：≤0.1%

• 冷冻稳定性：-20°C保存12个月（活性损失≤5%）
• 室温稳定性：25°C保存7天（参照GB/T5009.1-2003）
• 反复冻融：3次循环（性能变化≤2%）

• 聚合酶活性：≥5U/μL（参照ISO9001:2015）
• 热稳定性：95°C耐受30min（失活率≤1%）
• 逆转录酶效率：cDNA产量≥90%

• 引物二聚体：熔解曲线Tm值偏差≤1°C
• GC含量：40%-60%（特异性评分≥8）
• 退火温度优化：50-65°C（参照ISO13485:2016）

• 荧光强度：相对单位≥1000（背景≤100）
• 探针淬灭：FAM/TAMRA比率1.0-1.5
• 信号线性：ΔRn梯度响应R²≥0.98

• 成分偏差：dNTP浓度±0.1mM
• pH值范围：8.0-8.4（参照GB/T19495.2-2004）
• 盐离子浓度：Mg²⁺1.5-3.0mM

检测范围

1.标准PCR试剂：涵盖TaqDNA聚合酶混合液，重点检测酶活性稳定性和抑制剂耐受性，确保低拷贝目标扩增

2.实时PCR溶液：包括SYBRGreen或探针基试剂，侧重荧光信号线性范围和背景噪声控制，优化定量分析

3.DNA提取试剂：涉及硅胶柱或磁珠法溶液，重点检测残留抑制剂影响和模板回收率，提高灵敏度一致性

4.RNA相关溶液：涵盖逆转录PCR混合液，侧重cDNA合成效率和RNase抑制剂性能，确保RNA目标检测

5.多重PCR试剂：包括多引物组合溶液，重点检测交叉反应和扩增平衡性，优化多目标同步检测

6.快速PCR试剂：涉及热启动酶配方，侧重短时扩增效率和热稳定性，适用于快速诊断应用

7.高GC含量试剂：涵盖优化缓冲液，重点检测高GC模板的扩增特异性和效率，解决二级结构问题

8.低丰度样本试剂：包括预混液，侧重LOD验证和精度控制，适用于稀有突变检测

9.冻干PCR试剂：涉及脱水配方，重点检测复溶后活性和存储稳定性，确保运输耐受性

10.定制引物溶液：涵盖特定序列引物，侧重退火温度优化和二聚体抑制，提升目标特异性

检测方法

国际标准：

• ISO15189:2012医学实验室质量和能力要求
• ISO13485:2016医疗器械质量管理体系
• ISO17025:2017检测和校准实验室能力要求
• ISO9001:2015质量管理体系要求

• GB/T19495.2-2004核酸扩增检测方法
• GB/T5009.1-2003食品卫生检验方法总则
• GB/T16886.1-2011医疗器械生物学评价
• GB/T27407-2010实验室质量控制规范

检测设备

1.实时PCR仪：CFX96型（检测范围：1-10^9copies/μL，温度精度±0.1°C）

2.分光光度计：NanoDrop2000型（波长范围：190-840nm，吸光度精度±0.001OD）

3.电泳系统：DYY-6C型（电压范围：50-300V，分辨率1bp）

4.离心机：TG16-WS型（转速范围：0-16000rpm，温控精度±1°C）

5.恒温混匀仪：MX-S型（温度范围：4-100°C，混匀速度10-3000rpm）

6.微量加样器：P10型（量程0.5-10μL，精度±0.5%）

7.荧光显微镜：BX53型（激发波长范围：350-700nm，分辨率0.2μm）

8.热循环仪：T100型（温度梯度范围：4-99°C，升温速率4°C/s）

9.酶标仪：MultiskanGO型（检测模式：荧光、吸光，精度±1%）

10.核酸定量仪：Qubit4.0型（检测限：0.1-1000ng/μL，动态范围宽）

11.低温存储箱：DW-86L388型（温度范围：-86°C至-20°C，稳定性±1°C）

12.pH计：PHS-3C型（测量范围：0-14pH，精度±0.01）

13.振荡培养箱：ZHWY-211C型（温度范围：室温-60°C，振荡频率30-300rpm）

14.纯水系统：Milli-Q型（产水电阻率：18.2MΩ·cm，颗粒物<0.1μm）

15.凝胶成像系统：GelDocXR+型（像素分辨率：500万，动态范围宽）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质