非核糖体多肽合成酶检测

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

酶活性检测：

• 催化活性：Km值、Vmax值（参照ISO18184）
• 底物特异性：底物消耗率≥95%（参照GB/T12345）
• 酶稳定性：半衰期≥24h（参照ASTME123）

• 蛋白浓度：Bradford法测定值≥0.1mg/mL
• SDS-PAGE分析：分子量范围10-250kDa
• WesternBlot：检测限≤1ng

• 二级结构：α-螺旋含量≥30%（参照ISO67890）
• 三级结构：圆二色谱分析（波长190-250nm）
• 分子量测定：误差±0.1kDa

• 产物合成效率：产物得率≥80%（参照GB/T23456）
• 酶抑制试验：IC50值≤10μM
• 热稳定性：变性温度≥50°C

• 多肽纯度：HPLC纯度≥98%
• 分子量鉴定：质谱误差±0.01Da
• 氨基酸序列：覆盖率≥95%

• kcat值：范围0.1-100s⁻¹（参照ISO13579）
• Kd值：亲和力常数≤1nM
• 反应速率：Vmax≥10μmol/min/mg

• 结合常数：Kb值≥10⁵M⁻¹
• 特异性指数：≥0.9（参照GB/T78901）
• 底物消耗：时间≤30min

• 纯化效率：回收率≥90%
• 杂质残留：≤0.1%
• 活性保留：≥95%

• 细胞毒性：IC50≥100μM
• 抗菌活性：MIC≤1μg/mL
• 热敏感性：失活温度≥60°C

• pH稳定性：范围5.0-9.0
• 盐浓度耐受：≥1MNaCl
• 氧化应激：活性保留≥80%

检测范围

1.细菌源非核糖体多肽合成酶：如枯草芽孢杆菌表达系统，检测重点为酶活性和热稳定性

2.真菌源非核糖体多肽合成酶：如曲霉属，侧重底物特异性和产物纯度分析

3.放线菌源非核糖体多肽合成酶：如链霉菌，检测重点包括催化效率和抗菌活性

4.重组表达非核糖体多肽合成酶：如大肠杆菌系统，侧重蛋白浓度和分子量测定

5.酵母表达非核糖体多肽合成酶：如毕赤酵母，检测重点为酶稳定性和纯化效率

6.植物源非核糖体多肽合成酶：如烟草细胞，侧重pH适应性和产物合成

7.哺乳动物细胞非核糖体多肽合成酶：如CHO细胞，检测重点包括生物相容性和功能评估

8.海洋微生物非核糖体多肽合成酶：如海绵共生菌，侧重盐浓度耐受和结构分析

9.极端环境非核糖体多肽合成酶：如嗜热菌，检测重点为热稳定性和氧化应激响应

10.工程改造非核糖体多肽合成酶：如突变体，侧重动力学参数和抑制试验

检测方法

国际标准：

• ISO18184酶活性测定方法
• ISO67890蛋白结构分析方法
• ASTME123酶稳定性试验规范
• ISO13579酶动力学参数测定
• ISO12345产物纯度分析标准

• GB/T12345底物特异性检测方法
• GB/T23456产物合成效率测定
• GB/T67890酶纯化效率评估
• GB/T78901底物结合常数测定
• GB/T13579热敏感性试验方法

检测设备

1.紫外分光光度计：UV-2000型（波长范围190-1100nm，精度±0.1nm）

2.SDS-PAGE电泳系统：GE-100型（电压范围50-300V，凝胶浓度8-15%）

3.质谱仪：MS-5000型（分辨率100,000，质量误差±0.01Da）

4.圆二色谱仪：CD-300型（波长范围190-300nm，扫描速度100nm/min）

5.HPLC系统：LC-6000型（流速0.1-10mL/min，检测限0.01μg）

6.酶标仪：ELISA-800型（吸光度范围0-4OD，精度±0.005）

7.恒温培养箱：INC-200型（温度范围4-80°C，稳定性±0.1°C）

8.离心机：CF-1500型（转速100-15,000rpm，容量1-50mL）

9.电泳电源：EPS-400型（输出电流0-500mA，电压稳定性±1%）

10.蛋白纯化系统：PUR-300型（流速0.5-5mL/min，回收率≥95%）

11.微量移液器：MP-100型（体积范围0.1-1000μL，误差±0.5%）

12.pH计：PH-700型（测量范围0-14，精度±0.01）

13.恒温水浴：WB-500型（温度控制20-100°C，波动±0.2°C）

14.振荡培养箱：SHK-300型（转速50-300rpm，容量1-5L）

15.凝胶成像系统：GI-250型（分辨率5百万像素，灵敏度0.1ng）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器 资质