灵芝DNA指纹图谱分析

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

DNA提取与纯化：

• DNA浓度测定：A260/A280比值（1.8-2.0参照ISO21571）、A260/A230比值（≥2.0）
• 完整性检测：基因组DNA片段大小（≥20kb，参照GB/T35825）
• 杂质残留：蛋白质含量≤0.1μg/μl、多糖残留量≤0.05μg/μl

PCR扩增：

• 引物特异性：退火温度（50-65°C±1°C）、扩增效率（循环阈值Ct≤30）
• 产物浓度：DNA产量（≥20ng/μl）、非特异性扩增（条带数≤1）

凝胶电泳分析：

• 条带分离：分辨率（1-5kb范围，误差±5%）、迁移率（参照MarkerRuler）
• 荧光检测：SYBRGreen强度（RFU≥500）、背景噪音（≤10RFU）

SSR指纹图谱：

• 位点多态性：等位基因数（≥5个/位点）、杂合度（He≥0.6）
• 重复性测试：图谱匹配率（≥98%）

ISSR标记分析：

• 扩增条带：多态性比率（≥70%）、条带清晰度（无拖尾）
• 遗传距离：Nei's指数（0.1-0.9范围）

测序验证：

• 序列覆盖度：平均深度（≥30x）、缺口率（≤1%）
• SNP检测：变异位点频率（≥0.01）、错误率（≤0.1%）

物种鉴定：

• 同源性比较：BLAST匹配度（≥99%参照NCBI）、特异性位点（≥3个）
• 条形码分析：JianCe序列长度（600-700bp）、GC含量（40-60%）

遗传多样性：

• 聚类分析：Shannon指数（I≥1.5）、遗传分化系数（Fst≤0.15）
• 群体结构：AMOVAp值（<0.05）

稳定性测试：

• 降解评估：DNA半衰期（≥30天）、片段完整性（降解率≤5%）
• 环境抗性：温度耐受（-20至40°C稳定性）

污染控制：

• 微生物污染：外源DNA检出限（≤0.001%）、交叉污染率（≤0.1%）
• 试剂残留：抑制剂浓度（Ct延迟≤1cycle）

检测范围

1.灵芝孢子粉：检测DNA完整性及物种特异性，重点评估破壁工艺对基因组损伤

2.灵芝提取物：分析DNA残留浓度及纯度，侧重溶剂残留影响PCR效率

3.灵芝菌丝体：检测基因组DNA指纹图谱，重点为发酵培养变异监测

4.灵芝子实体：进行物种鉴别和同源性比较，侧重生长年限遗传标记

5.灵芝发酵产品：检测微生物污染DNA，重点为细菌真菌交叉污染

6.灵芝胶囊制剂：评估DNA降解程度，侧重包材吸附效应

7.灵芝茶饮品：检测植物源DNA交叉污染，重点为冲泡温度影响

8.灵芝护肤品：分析DNA稳定性，侧重防腐剂降解作用

9.灵芝保健品：进行真伪鉴别，重点为掺假物种SSR位点差异

10.灵芝药材原料：检测重金属影响DNA质量，侧重储存条件变异

检测方法

国际标准：

• ISO21571:2005食品中DNA提取纯化方法
• ISO24276:2006转基因生物PCR检测通则
• ISO17025:2017测试实验室能力通用要求

国家标准：

• GB/T35825-2018中药DNA条形码分子鉴定法
• GB/T30957-2014基因检测技术规范
• GB/T22294-2008中药材DNA提取方法

方法差异说明：ISO标准侧重缓冲液组分（如CTAB法），GB标准优化提取效率（如硅胶柱纯化）；ISOPCR使用Taq酶标准程序，GB要求退火温度梯度；ISO测序推荐Illumina平台，GB兼容国产测序仪

检测设备

1.PCR扩增仪：Bio-RadT100型（温度范围4-99°C，精度±0.1°C）

2.凝胶电泳系统：Agilent4200TapeStation（分辨率1bp，电压范围50-300V）

3.紫外分光光度计：NanoDrop2000c（波长190-840nm，检测限0.2ng/μl）

4.高速离心机：Eppendorf5425R（转速100-15000rpm，容量24×1.5ml）

5.高通量测序仪：IlluminaMiSeq（通量15Gb，读长2×300bp）

6.恒温培养箱：MemmertIN55（温度范围5-70°C，均匀度±0.5°C）

7.紫外透射仪：UVPBioDoc-It（波长302nm，灵敏度0.1ngDNA）

8.冷冻干燥机：LabconcoFreeZone2.5L（真空度0.1mbar，阱温-84°C）

9.振荡混合器：IKAKS130basic（转速50-1500rpm，振幅20mm）

10.生物安全柜：EscoAirstream（洁净度Class100，风速0.4m/s）

11.超低温冰箱：ThermoScientificRevcoJianCeT（温度-86°C，容量700L）

12.纯水制备系统：MilliporeMilli-Q（电阻率18.2MΩ·cm，流速1.5L/min）

13.离心浓缩仪：SpeedVacSPD120（真空速率高，温度控制30-60°C）

14.荧光显微镜：OlympusBX53（放大倍率40-1000x，荧光通道DAPI/FITC）

15.水浴锅：JulaboSW22（控温精度±0.1°C，容量22L）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器资质