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肽核酸结合能力分析

2025-09-02关键词:肽核酸结合能力分析,中析研究所,CMA/CNAS资质,北京中科光析科学技术研究所相关:
肽核酸结合能力分析

肽核酸结合能力分析摘要:肽核酸(PNA)结合能力分析专注于评估PNA与靶标DNA/RNA的相互作用特性,核心检测对象包括PNA-oligonucleotide hybrids。关键项目涵盖结合常数(Kd)、解离常数(Koff)、熔解温度(Tm)及动力学参数(Kon、Koff),采用表面等离子共振(SPR)和等温滴定量热(ITC)等标准方法,确保数据准确性和重现性,应用于分子诊断和 therapeutics 开发。

参考周期:常规试验7-15工作日,加急试验5个工作日。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

亲和力检测:

  • 结合常数测定:Kd值(单位nM,参照ASTME2184-14)
  • 解离常数测定:Koff值(单位s⁻¹,偏差±5%)
特异性检测:
  • 错配容忍度:结合效率降低率≤5%
  • 交叉反应性:非靶标结合率≤1%(参照ISO10993-5)
动力学检测:
  • 结合速率测定:Kon值(单位M⁻¹s⁻¹)
  • 解离速率测定:Koff值(单位s⁻¹)
热力学检测:
  • 焓变测定:ΔH值(单位kJ/mol)
  • 熵变测定:ΔS值(单位J/mol·K)
稳定性检测:
  • 熔解温度测定:Tm值(单位°C,精度±0.5°C)
  • 热稳定性评估:降解温度Td≥80°C
结构分析检测:
  • 二级结构鉴定:圆二色谱(CD)峰形分析
  • 三级结构评估:NMR化学位移(参照PDB标准)
荧光特性检测:
  • 荧光量子产率:Φ≥0.8
  • 荧光寿命:τ值(单位ns,偏差±0.1ns)
生物相容性检测:
  • 细胞毒性评估:存活率≥90%(参照ISO10993-5)
  • 免疫原性测试:抗体产生率≤2%
环境稳定性检测:
  • pH稳定性:结合能力保持率≥95%(pH6-8)
  • 温度稳定性:活性保持率≥90%(4-37°C)
应用性能检测:
  • 诊断灵敏度:检测限≤1pM
  • 治疗效价:IC50值(单位nM)

检测范围

1.未修饰肽核酸:基础PNA序列,检测重点为亲和力参数和热力学特性,确保无修饰下的结合性能。

2.荧光标记肽核酸:带荧光基团(如FAM、Cy5)的PNA,侧重荧光量子产率和标记效率验证。

3.细胞穿透肽核酸:融合细胞穿透肽的PNA,评估细胞内结合能力和生物分布。

4.PNA-DNA嵌合体:PNA与DNA杂交体,检测杂交稳定性和解链温度。

5.PNA-RNA复合物:PNA与RNA相互作用,重点分析特异性和抗酶解能力。

6.生物样品中的肽核酸:血清或细胞裂解液中的PNA,检测回收率和结合干扰因素。

7.纳米载体负载肽核酸:脂质体或聚合物包裹PNA,评估负载效率和释放动力学。

8.修饰碱基肽核酸:含非天然碱基的PNA,检测结合亲和力和编码能力。

9.肽核酸微阵列:固相支持PNA,侧重点样密度和杂交一致性。

10.治疗用肽核酸制剂:药物配方中的PNA,检测稳定性、效价和纯度。

检测方法

国际标准:

  • ASTME2184-14表面等离子共振生物传感器检测法
  • ISO10993-5医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
  • ISO14877-1生物分子相互作用动力学分析通用要求
国家标准:
  • GB/T37864-2019生物芯片通用技术要求
  • GB/T39100-2020纳米材料生物效应评估方法
  • GB/T21844-2020药物与靶标结合常数测定法
方法差异说明:ASTME2184-14强调SPR传感器的校准和数据拟合,而GB/T21844-2020更注重溶液相测定和统计验证;ISO10993-5要求细胞培养条件严格控温,GB/T39100-2020则扩展至纳米尺度效应评估。

检测设备

1.表面等离子共振仪:BiacoreT200(检测范围0.1-1000RU,流速1-100μL/min)

2.等温滴定量热仪:MicroCalITC200(温度范围2-80°C,灵敏度0.1μcal/s)

3.荧光光谱仪:HitachiF-7000(波长范围200-900nm,分辨率0.1nm)

4.圆二色谱仪:JascoJ-1500(波长范围190-800nm,扫描速度50-1000nm/min)

5.紫外-可见分光光度计:ShimadzuUV-2600(波长范围190-1100nm,带宽0.1-5nm)

6.核磁共振谱仪:BrukerAvanceIII600MHz(磁场强度14.1T,分辨率0.001ppm)

7.微量热泳动仪:MonolithNT.115(温度范围4-40°C,检测限0.1nM)

8.动态光散射仪:MalvernZetasizerNanoZS(尺寸范围0.3nm-10μm,精度±1%)

9.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(压力范围0-600bar,检测器波长190-900nm)

10.细胞培养系统:ThermoScientificHeracell150i(温度控制37°C±0.5°C,CO2控制5%±0.1%)

11.实时荧光定量PCR仪:AppliedBiosystems7500(温度精度±0.1°C,荧光通道4-6个)

12.原子力显微镜:BrukerDimensionIcon(分辨率原子级,扫描范围90μm×90μm)

13.激光共聚焦显微镜:LeicaTCSSP8(分辨率0.2μm,波长范围400-800nm)

14.电化学工作站:CHI660E(电位范围±10V,电流精度0.1pA)

15.离心机:EppendorfCentrifuge5430R(转速100-15000rpm,温度控制-20°C至40°C)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

中析仪器资质

中析肽核酸结合能力分析-由于篇幅有限,仅展示部分项目,如需咨询详细检测项目,请咨询在线工程师

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