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核酸样品质量检测

2025-08-19关键词:核酸样品质量检测,中析研究所,CMA/CNAS资质,北京中科光析科学技术研究所相关:
核酸样品质量检测

核酸样品质量检测摘要:核酸样品质量检测聚焦DNA和RNA样本的核心质量参数评估,确保下游应用可靠性。核心检测对象包括核酸浓度、纯度、完整性和污染物。关键项目涵盖紫外吸收比值(A260/A280≥1.8)、荧光定量浓度(检测限0.1pg/μL)、凝胶电泳完整性(片段分布清晰度)及酶残留测试。严格遵循规范,支持PCR、测序等分子操作,保障样本准确性和稳定性。检测过程采用标准化方法,实现高通量精准分析。

参考周期:常规试验7-15工作日,加急试验5个工作日。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

纯度评估:

  • A260/A280比值:纯度指标(≥1.8)
  • A260/A230比值:污染物检测(≤2.0)
  • 吸光度扫描:全波长扫描(230-300nm)
浓度测定:
  • UV吸收法:浓度计算(μg/mL,基于A260)
  • 荧光定量法:高灵敏度检测(检测限0.1pg/μL)
  • PicoGreen法:双链DNA定量(线性范围宽)
完整性分析:
  • 凝胶电泳:片段分布评估(条带清晰度)
  • RIN值:RNA完整性数(≥7.0)
  • 毛细管电泳:片段大小分辨率(1bp精度)
污染物检测:
  • 蛋白质残留:Lowry法测定(≤50μg/mL)
  • 盐分残留:电导率测试(≤5mS/cm)
  • 酚/氯仿残留:紫外吸收检测(A270<0.1)
酶活性测试:
  • DNase残留:凝胶降解试验(无降解条带)
  • RNase残留:RNA孵育测试(Ct值变化≤1)
PCR兼容性:
  • 扩增效率:Ct值评估(斜率-3.1至-3.6)
  • 特异性检测:非特异性条带分析(无杂带)
  • 抑制剂测试:扩增抑制率(≤10%)
片段大小分布:
  • 片段长度定量:bp范围测定(100-10000bp)
  • 大小均一性:峰宽分析(CV≤5%)
稳定性测试:
  • 温度稳定性:降解速率监测(-80°C储存)
  • 长期稳定性:重复检测一致性(RSD≤5%)
微生物污染:
  • 细菌DNA检测:16S基因定量(Ct值≥35)
  • 真菌污染:JianCe序列筛查(无扩增)
定量准确性:
  • qPCR标准曲线:R²值(≥0.99)
  • ddPCR绝对定量:拷贝数计算(误差±5%)

检测范围

1.基因组DNA样品:从血液或组织提取,重点检测纯度和完整性,防止降解影响下游应用

2.血浆游离DNA:低丰度样本,侧重浓度测定和碎片化分析,确保癌症筛查准确性

3.总RNA样品:细胞或组织来源,核心检测RIN值和降解程度,保障转录组研究

4.PCR扩增产物:包括扩增子,重点验证片段大小和引物二聚体污染

5.质粒DNA样品:细菌克隆制备,检测拓扑结构和浓度,确保转染效率

6.病毒核酸样本:如SARS-CoV-2RNA,侧重提取回收率和抑制剂残留

7.环境微生物核酸:土壤或水体提取,评估污染物影响和物种多样性

8.法医DNA样本:陈旧或微量样本,监控降解和外来污染控制

9.合成寡核苷酸:引物或探针,确认序列准确性和纯度

10.细胞培养核酸:培养物提取,检测培养基残留和细胞活力影响

检测方法

国际标准:

  • ISO21571:2005食品核酸提取与纯化方法
  • ISO22174:2005食源性病原体核酸检测通用要求
  • ISO17822:2020体外诊断核酸样本质量规范
国家标准:
  • GB/T19495.2-2024基因检测核酸样品质量要求
  • GB/T34796-2017核酸浓度紫外吸收测定方法
  • GB/T37870-2019微生物核酸提取试剂盒标准
方法差异包括国际标准更注重食品安全应用,而国家标准强调临床样本的灵敏度要求

检测设备

1.紫外-可见分光光度计:NanoDrop2000型(波长范围190-840nm,精度±0.003A)

2.荧光定量仪:Qubit4.0型(检测限0.1pg/μL,动态范围宽)

3.毛细管电泳系统:Bioanalyzer2100型(分辨率1-12000bp,通量12样本/次)

4.实时荧光定量PCR仪:QuantStudio7型(通道数6,温控精度±0.1°C)

5.核酸提取仪:KingFisherFlex型(处理量96样本,磁珠回收率≥95%)

6.高速离心机:5425R型(最大转速15000rpm,温度范围-10℃至40℃)

7.恒温混合仪:ThermoMixerC型(温度范围-10℃至100℃,振荡速度300-1400rpm)

8.PCR扩增仪:T100型(升温速率4°C/s,孔间温度差异≤0.5°C)

9.凝胶成像系统:G:BOX型(分辨率5百万像素,曝光时间1-60秒)

10.数字PCR系统:QX200型(分区数20000,绝对定量误差±3%)

11.测序仪:MiSeq型(产出量15Gb,读长2x300bp)

12.电泳电源:PowerPacBasic型(电压范围10-300V,电流稳定性±1%)

13.恒温水浴:WB22型(温度稳定性±0.1°C,容量22L)

14.超净工作台:ClassII型(洁净度ISO5,风速0.45m/s)

15.冷冻离心机:SorvallLegendX1R型(温度范围-20°C至40°C,最大容量4x250mL)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

中析仪器资质

中析核酸样品质量检测-由于篇幅有限,仅展示部分项目,如需咨询详细检测项目,请咨询在线工程师

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