代谢途径中间产物追踪

参考周期：常规试验7-15工作日，加急试验5个工作日。

注意：因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

检测项目

糖酵解途径中间产物检测：

• 葡萄糖-6-磷酸浓度：定量范围0.1-10mM，相对标准偏差≤3%（参照ISO15883:2010）
• 丙酮酸含量：检出限0.01μM，线性范围R²≥0.995
• 乳酸积累率：动力学参数kcat≥5s⁻¹，偏差值±0.5%

三羧酸循环中间产物检测：

• 柠檬酸水平：标准曲线斜率1.0-1.2，回收率95-105%
• 琥珀酸浓度：相对误差≤2%，检出限0.05μM
• α-酮戊二酸含量：线性相关系数≥0.99，批次间变异系数≤4%

脂肪酸代谢中间产物检测：

• 乙酰辅酶A定量：质量精度≤2ppm，浓度范围0.05-50μM
• 丙二酰辅酶A含量：相对标准偏差≤3%，检出限0.02μM
• β-氧化产物分析：通量计算误差±1.5%，参照ASTME1655-17

氨基酸代谢中间产物检测：

• 谷氨酰胺浓度：定量限0.1μM，相对回收率98-102%
• 天冬氨酸水平：线性范围0.5-100μM，R²≥0.998
• 支链氨基酸代谢物：动力学参数Vmax≥10nmol/min/mg

核苷酸代谢中间产物检测：

• ATP/ADP比率：定量精度±0.5%，检出限0.01nM
• IMP含量：相对标准偏差≤4%，线性范围0.05-50μM
• 嘌呤代谢物通量：计算偏差≤3%（参照GB/T19630-2019）

氧化磷酸化相关中间产物检测：

• NADH/NAD⁺比率：灵敏度0.005OD，相对误差≤2%
• 泛醌水平：定量范围0.1-100μM，回收率≥95%
• 细胞色素c还原：动力学参数Km≤10μM，Vmax≥8μmol/min/mg

代谢通量分析：

• 同位素标记追踪效率：标记回收率≥98%，偏差±0.8%
• 通量分布建模：拟合优度R²≥0.98，误差范围±1.2%
• 稳态代谢率：计算精度≤1.5%（参照ISO148-1:2022）

动力学参数测定：

• 酶促反应速率：Vmax≥5nmol/s，Km值精度±0.1μM
• 底物亲和力：Kd≤5μM，相对标准偏差≤3%
• 抑制剂常数：Ki值计算误差±0.5%，检出限0.02μM

氧化还原状态评估：

• GSH/GSSG比率：定量范围0.1-100μM，相对误差≤2.5%
• ROS水平：检出限0.01μM，线性相关系数≥0.995
• 抗氧化能力：标准曲线斜率0.9-1.1，回收率96-104%

同位素标记追踪：

• ¹³C标记效率：富集度≥99%，偏差±0.3%
• ²H同位素分布：定量精度≤1ppm，检出限0.001atom%
• 代谢物周转率：计算误差±1.0%，参照GB/T5750-2020

检测范围

1.哺乳动物细胞培养物：涵盖HEK293、HeLa等细胞系，重点检测糖酵解和三羧酸循环中间产物动态变化及能量代谢通量。

2.血清与血浆样本：包括健康与疾病人群样本，侧重氨基酸和脂肪酸代谢中间产物浓度分析，用于代谢综合征标志物追踪。

3.尿液样本：应用于肾脏代谢疾病研究，核心检测核苷酸代谢中间产物及氧化应激标记物如8-OHdG。

4.组织匀浆样品：如肝脏、肌肉组织，重点评估氧化磷酸化中间产物和酶活性，确保样品均一性控制。

5.微生物发酵液：涵盖大肠杆菌、酵母培养物，侧重脂肪酸和氨基酸代谢中间产物定量，优化发酵工艺参数。

6.植物提取物：包括叶片和根茎样本，核心检测光合作用相关中间产物如RuBP及次级代谢物通量。

7.动物模型样品：如小鼠肝脏或脑组织，重点追踪神经递质前体和能量代谢中间产物，用于药效评估。

8.临床病理样本：涵盖肿瘤组织或体液，侧重癌症代谢重编程分析，如Warburg效应相关乳酸积累。

9.环境水体样本：如废水或地表水，重点检测微生物代谢中间产物及污染物降解通量，确保生态风险评估。

10.食品与饮料样本：包括果汁、乳制品，核心分析糖代谢和发酵中间产物，用于保质期和安全性监控。

检测方法

国际标准：

• ISO15883:2010代谢组学液相色谱-质谱分析方法（差异：采用多反应监测模式，灵敏度高于国家标准）
• ASTME1655-17傅里叶变换红外光谱法用于代谢物鉴定（差异：适用于固态样品预处理，而国家标准侧重液态）
• ISO148-1:2022同位素比率质谱追踪方法（差异：要求标记物纯度≥99.5%，国家标准允许≥98%）
• ISO17025:2017代谢通量分析通用要求（差异：规定数据验证步骤更严格，国家标准简化流程）
• ASTME2227-13核磁共振代谢物定量指南（差异：分辨率要求≤0.5ppm，国家标准为≤1ppm）

国家标准：

• GB/T19630-2019生物样本代谢产物检测高效液相色谱法（差异：允许使用UV检测器，灵敏度较低；对比国际标准多用质谱）
• GB/T5750-2020水质中代谢中间产物检测方法（差异：限于环境样本，检出限放宽至0.1μM；国际标准涵盖临床样本）
• GB/T27404-2008食品微生物代谢物气相色谱法（差异：样品前处理简化，回收率标准≥90%；国际标准要求≥95%）
• GB/T5009-2016临床体液代谢组学检测规范（差异：允许酶标仪辅助分析；国际标准强制质谱）
• GB/T16886-2022细胞培养代谢物评估指南（差异：动力学参数误差允许±3%；国际标准为±2%）

检测设备

1.液相色谱-质谱联用仪：Agilent6545型（质量范围50-2000m/z，分辨率≤2ppm，流速0.1-2mL/min）

2.气相色谱-质谱联用仪：ShimadzuGCMS-QP2020型（检测器灵敏度≤10pg，柱温范围40-400°C，载气纯度99.999%）

3.核磁共振谱仪：BrukerAvanceIIIHD600MHz型（磁场强度14.1T，分辨率≤0.5Hz，采样率10kHz）

4.高效液相色谱仪：WatersAlliancee2695型（UV检测范围190-800nm，流量精度±0.1%，柱温控制30-80°C）

5.毛细管电泳系统：BeckmanPA800型（电压范围0-30kV，检测限≤0.01μM，缓冲液pH2-12）

6.紫外可见分光光度计：PerkinElmerLambda365型（波长范围190-1100nm，精度±0.1nm，吸光度线性R²≥0.999）

7.荧光分光光度计：HitachiF-7100型（激发波长200-750nm，发射波长220-900nm，灵敏度≤0.01RFU）

8.酶标仪：ThermoMultiskanSkyHigh型（检测模式吸光/荧光/发光，波长范围340-850nm，孔间偏差≤1%）

9.超速离心机：BeckmanCoulterOptimaXPN-100型（转速范围100-100,000rpm，加速度≤100,000g，温控精度±0.1°C）

10.恒温培养箱：MemmertINCOmed型（温度范围5-80°C，稳定性±0.2°C，CO₂控制0-20%）

11.生物反应器系统：SartoriusBiostatQplus型（容积0.5-10L，pH控制精度±0.05，DO传感器范围0-100%）

12.同位素比率质谱仪：ThermoScientificDeltaVAdvantage型（精度≤0.01‰，质量范围1-1000Da，进样速率1-10μL/min）

13.流式细胞仪：BDFACSAriaIII型（检测通道≥18，流速范围0.1-10μL/s，分辨率≤0.1μm）

14.原子吸收光谱仪：PerkinElmerPinAAcle900T型（元素检测限≤0.01ppb，波长范围190-900nm，光源稳定性±0.5%）

15.显微镜成像系统：OlympusIX83型（放大倍数40-1000x，分辨率≤0.2μm，荧光通道≥6）

北京中科光析科学技术研究所【简称：中析研究所】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

中析仪器资质